复方守宫散对Lewis肺癌小鼠JAK2-STAT3信号通路的影响(2)
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1.3 分组与给药
随机分为阳性对照组、高剂量复方守宫散组、中剂量守宫散组、低剂量守宫散组、顺铂组，每组10只。实验第2天(造模成功24h后)，阳性对照组：灌服生理盐水0.2mL，1次/d；中药组灌服复方守宫散高剂量组0.6mL(相当于120mg/kg)，中剂量组0.4mL(相当于60mg/kg)，低剂量组0.2mL(相当于40g/kg)，1次/d；顺铂组按1mg/kg给药，0.1mL/只腹腔注射。每天1次，共14d。
1.4 药品与试剂
(l)复方守宫散(安徽省中医院中药房)。(2)顺铂(江苏豪森药业股份有限公司，国药准字H200408l3，产品批号070902)。(3)①电化学发光(ECL)试剂盒：美国pierce公司 ；②actin(购自北京中山公司)；③DMEM培养基(美国Gibco公司生产)；④ 山羊抗兔二抗 、JAK2、STAT3(北京博奥森生物技术有限公司)；⑤10%胎牛血清(杭州四季青生物制品有限公司)。
1.5 实验器材
水浴恒温振荡器，湘仪高速离心机，生物安全柜，光学显微镜，包埋机，手动石蜡切片机，摊片机，烘片机，智能化组织脱水机，电子天平，高速冷冻离心机，电泳仪，凝胶自动成像及分析系统等。
1.6 观察指标
1.6.1 肿瘤抑制率 停药后第2日处死动物，完整剥取肿瘤，称重量，计算肿瘤抑制率。抑瘤率=(对照组平均瘤重-实验组平均瘤重)/对照组瘤重×100%。
1.6.2 瘤组织JAK2、STAT3蛋白测定 采用Western blot 法。剪取肿瘤组织，称重，每个样品重量在100mg左右，加入RIPA细胞裂解液1mL(内含1mM PMSF)进行裂解。离心，收集上清液，即含有组织总蛋白。在收集的蛋白样品中加入等量的2X SDS-PAGE蛋白上样缓冲液。沸水浴加热10min ......
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