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编号:13147202
银杏叶提取物对AGEs诱导的大鼠HSC增殖的抑制作用(2)
http://www.100md.com 2013年11月15日 史美娜 栗华
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    参见附件。

     1.3 药物处理

    采用无血清RPMI 1640细胞培养液溶解EGb,37℃恒温水浴箱中加热30min,离心观察EGb完全溶解,调节pH值和渗透压,经0.45μm滤器过滤除菌后,4℃贮存备用。

    1.4 细胞培养

    将冻存于液氮中的HSC(大鼠HSC-T6细胞株,已活化)取出,迅速置37℃水浴解冻复苏后,采用含100kU/L青霉素、100kU/L链霉素、100mL/L胎牛血清的RPMI 1640培养液,在37℃、50mL/L CO2及饱和湿度条件下培养,隔天换液,待细胞将近长满培养瓶底时,用2.5g/L胰蛋白酶消化,按1∶3传代,所有实验均取对数生长期细胞。

    1.5 实验分组

    1.5.1 AGEs对HSC增殖的影响 分4组,每组6孔:正常对照组(AN组,AGEs 0mg/L)、AGEs低浓度组(AL组,AGEs 25mg/L)、AGEs中浓度组(AM组,AGEs 50mg/L)、AGEs高浓度组(AH组,AGEs 100mg/L)。

    1.5.2 EGb对AGEs引起的HSC增殖的影响 分5组,每组6孔:正常对照组(EN组,AGEs、Egb各0mg/L)、AGEs对照组(EA组,AGEs 50mg/L+Egb 0mg/L)、AGEs+低剂量EGb组(EL组,AGEs 50mg/L +Egb 50mg/L)、AGEs+中剂量EGb组(EM组,AGEs 50mg/L +Egb 100mg/L)、AGEs+高剂量EGb组(EH组 ......

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