子痫前期胎盘组织中STOX1的表达及意义(2)
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1.3.2?Western-blot检测胎盘组织中STOX1蛋白的表达?按蛋白裂解液说明书提取胎盘组织中的总蛋白,样本蛋白按5∶1加入上样缓冲液煮沸变性后待用。取等量蛋白样本加入SDS-PAGE凝胶槽中进行电泳(浓缩胶60 V,20 min,分离胶120 V,60 min)。转至PVDF膜,经5%脱脂奶粉室温封闭4 h,加入1∶5000稀释的抗STOX1一抗,室温孵育3 h,TBST洗3次,加入辣根过氧化酶标记的二抗(1∶1 000),室温孵育1 h,TBST洗3次。加ECL化学发光剂,X线片暗室曝光,常规显影、定影。洗片后用激光扫描仪进行定量分析。以β-actin为内参照物,STOX1与β-actin的条带灰度值的比值表示STOX1蛋白表达水平。
1.4?统计学处理
采用SPSS12.0统计软件进行数据统计学分析,结果以()表示,组间比较采用t检验,以P<0.05为差异有统计学意义。
2?结果
2.1?免疫组化检测胎盘组织中STOX1蛋白的定位及表达
STOX1主要表达于绒毛的合体滋养细胞和细胞滋养细胞,其中子痫前期的染色更强。用IPP图像分析系统测定各组STOX1阳性产物的平均光密度值,重度子痫前期组明显高于轻度子痫前期组,轻度子痫前期组明显高于正常妊娠组,两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。见图1、表1。
2.2?Western blot 检测胎盘组织中STOX1蛋白的表达量
与正常妊娠组相比,子痫前期胎盘组织中STOX1蛋白表达量明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。重度子痫前期组患者胎盘组织中STOX1相对蛋白含量(0 ......
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