1.3?荧光定量PCR反应

    所有标本均送中山大学达安基因公司进行检测，采用荧光定量PCR法检测大肠埃希菌TEM型β-内酰胺酶基因，PCR试剂盒由中山大学达安基因公司提供。

    Forward Primer(正向引物)：5’-GGCTGGTTAACGACGTTACGACT-3’，Reverse Primer(反向引物)： 5’-AAACGTTCAGGACGGGCTA-3’。肺炎克雷伯菌ATCC700603为阳性对照，大肠埃希菌ATCC25922为阴性对照。

    仪器：ABI 7500全自动荧光定量PCR仪，ABI 9700 PCR仪，ABI 3900台式高通量DNA合成仪，科大创新HC-3018R高速冷冻离心机。

    1.4?药敏试验分析

    本研究采用琼脂稀释法测定药物最低抑菌浓度(minimal inhibition concentration，MIC)，方法和药敏判断标准按照CLSI文件M100-S20(2010年版)规定 ......