VEGF基因转染间充质干细胞移植与单纯间充质干细胞移植对大鼠心肌梗死的疗效对比(2)
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1.2.5 细胞移植和实验分组40只用于制作模型的大鼠有8只在<6 h死亡,在大鼠心肌缺血模型成功建立1周后,随机选择30只大鼠,采用随机分组法分为3组,每组10只。A组为联合移植组:将VEGF转染骨髓间充质干细胞(1×106)与无血清DMEM配置成200 μl,将大鼠暴露心脏,使用微量注射器经心外膜途径在心肌梗死中央及外周移植细胞50 μl/点;B组为单纯干细胞移植组:使用同等量的骨髓间充质干细胞与DMEM制成细胞悬液,采用同等方法注入大鼠心肌;C组为对照组:使用等量DMEM培养液,采用A组和B组的方法注入大鼠心肌。
1.3 检测方法
1.3.1 超声心动图检查模型建立后,在细胞移植前和细胞移植后第3周分别采用超声心动图检测射血分数(EF),每只测量3个心动周期,取平均值。
1.3.2 免疫组织化学检查细胞移植后第4周处死大鼠,制作心肌细胞连续切片,并进行HE常规染色和BrdU染色,确定心肌细胞的存活与分化。
1.3.3 新生毛细血管密度计数在200倍光学显微镜下观察并统计毛细血管数量,每张切片随机取4个视野,取其平均数。
1.4 统计学处理
采用SPSS 10.0统计软件对数据进行分析和处理,计量资料以x±s表示,组间比较采用F检验,两两比较采用q检验,以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 3组大鼠细胞移植前后EF的比较
细胞移植后3周,A组的EF高于B组和C组,B组的EF高于C组,差异有统计学意义(P<0.05)(表1)。
表1 3组大鼠细胞移植前后EF的比较(%,x±s)
与A组比较,*P<0.05;与C组比较,#P<0 ......
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