VEGF—C在NSCLC中的表达及其临床意义(1)
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[摘要] 目的 血管内皮生长因子-C(VEGF-C)倾向于扩散至淋巴系统，被认为是最具特异性的淋巴管生成调控因子。本研究旨在探讨VEGF-C在非小细胞肺癌中的表达及临床意义。 方法 采用免疫组化检测70例非小细胞肺癌标本中VEGF-C的表达，以癌旁组织19例、正常肺组织20例为对照。 结果 VEGF-C在NSCLC中的阳性表达率为78.6%，明显高于在癌旁组织和正常肺组织的表达；淋巴结转移组的肺癌标本中VEGF-C阳性表达率明显高于在无淋巴结转移组肺癌中表达率；低分化组的肺癌标本中VEGF-C阳性表达率高于在中高分化组中表达率。Logistic回归分析显示肿瘤组织分化程度是VEGF-C蛋白阳性表达影响因素。 结论 VEGF-C在肺癌中有较高的表达率，且与淋巴结转移密切相关，提示VEGF-C与肺癌的发生、侵袭和转移存在相关性，可作为评估肺癌进展客观指标及预测肺癌淋巴转移的标志物。
[关键词] 肺肿瘤；免疫组织化学；血管内皮生长因子-C
[中图分类号] R734.2 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701(2012)32-0051-03
目前在世界范围内，肺癌已成为癌症死亡的主要原因，严重危害人类健康和生命[1]。肺癌死亡率仍高居癌症死亡第一位，远处转移是治疗失败的主要原因。肿瘤细胞侵袭和转移严重影响患者预后，然而肿瘤的这种生物学特性仍是研究难题。VEGF-C作为fms样酪氨酸激酶4的配体，倾向于扩散至淋巴系统，被认为是最具特异性的淋巴管生成调控因子。本研究采用免疫组化检测非小细胞肺癌组织及正常组织中VEGF-C表达，分析其在NSCLC中的表达及临床意义。
1 材料与方法
1.1 研究对象
选取浙江省台州医院2004～2007年70例NSCLC患者住院行肺癌根治术标本，男52例，女18例，年龄35～80岁；所有病例术前均未接受化疗或放疗。标本按WHO肺癌病理组织学分型：腺癌34例，鳞癌36例；组织分化程度：低分化27例，高中分化43例；无淋巴结转移33例，淋巴结转移37例。肿瘤TNM分期：T1期18例，T2期41例，T3期9例，T4期2例。N分期：N0期33例，N1期28例，N2期9例。另取距肿块边缘1.5 cm的癌旁组织19例，距肿块边缘5 cm正常肺组织20例。
1.2 实验试剂与方法
兔抗人VEGF-C多克隆抗体购于美国INVITROGEN公司，Envision免疫组化试剂盒、DAB显色试剂盒购于北京中杉生物公司。操作按试剂盒说明书进行，采用免疫组化Envision两步法，用高压热修复法，以已知阳性切片作阳性对照，以PBS代替一抗作阴性对照。
1.3 分级标准
染色强度及细胞阳性范围作为分级标准。细胞浆染色强度计分：无着色为0分，淡黄染色为1分，棕黄色为2分，棕褐色/胞浆内棕黑色颗粒为3分；细胞阳性范围计分：<5%为0分，6%～25%为1分，26%～50%为2分，51%～75%为3分，>75%为4分；再将染色强度与阳性细胞率作乘积分级：>3分为(+)，6～9分为(++)，9～12分为(+++)，凡(+)及其以上者为阳性表达[2]。
1.4 统计学方法
采用统计学软件SPSS 17.0进行χ2检验或四格表确切概率法，回归分析采用Logistic回归，P < 0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 VEGF-C染色结果
VEGF-C在不同肺组织中的表达见图1。VEGF-C阳性染色为黄色、棕黄色、棕褐色，定位于细胞浆和/或膜上。VEGF-C在NSCLC中的阳性表达率为78.6%(55/70)，在癌旁组织以及正常肺组织中的阳性表达率分别为31.6%(6/19)、10.0%(2/20)，组间差异有统计学意义(表1)。
2.2 VEGF-C的表达与NSCLC临床病理特征的关系
VEGF-C在淋巴结转移组中阳性表达率为89.2%；无淋巴结转移组VEGF-C的阳性表达率为66.7%%；组间差异具有统计学意义。中高分化组和差分化组组间VEGF-C的阳性表达率分别为69.8%、92.6%，组间差异具有统计学意义；VEGF-C在肺鳞癌和肺腺癌中阳性表达率分别为66.7%、91.2%，组间差异具有统计学意义。VEGF-C在肿块直径≤3 cm的癌标本中阳性表达率为63.2%，在肿块直径>3 cm的癌标本中阳性表达率为84.3%，组间差异无统计学意义；VEGF-C在男性/女性患者的阳性表达率分别为80.8%和72.2%，差异无统计学意义；在>55岁或≤55岁的患者中，VEGF-C的阳性表达率分别为82.6%和70.8%，差异无统计学意义；VEGF-C在吸烟者和不吸烟者中阳性表达率分别为81.3%、72.7%，差异无统计学意义(表2)。
2.3 VEGF-C表达与NSCLC临床病理特征Logistic回归分析
见表3。
将VEGF-C表达与各临床病理特征进行Logistic回归分析 ......
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