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编号:12855473
右美托咪定混合氯胺酮对新生大鼠离体海马细胞凋亡的影响(2)
http://www.100md.com 2016年5月15日 《中国实用医药》 2016年第14期
     1. 2 方法

    1. 2. 1 海马神经元培养 取新生7 d内的SD大鼠在无菌环境中, 剪开皮肤和颅骨, 取脑组织置预冷D-Hank’ S液的培养皿中, 在显微镜下取海马。将海马移至另一预冷HBSS液的培养皿中剪碎, 将海马移至另一预冷HBSS液的培养皿中剪碎, 加入胰蛋白酶, 加入等量HBSS液, 置37℃ 、5% CO2 培养箱消化15 min。用含10% 胎牛血清的DMEM/F12终止反应, 吹散为单细胞悬液, 静置后取上清液, 约1000 r/min离心5 min, 弃上清细胞计数后, 用含2% B27、EGF、bFGF培养基稀释使细胞数为5×105个/ml, 以100 μl接种于96孔培养板中, 37℃ 、5%CO2 培养箱中培养, 24 h后全量换液, 48 h后加入终浓度为10 μmol/L阿糖胞苷作用24 h更换新培养液, 以后每2天半量换液, 培养6 d用于实验。

    1. 2. 2 实验分组 将对数生长期的新生大鼠海马神经元随机分为对照组(C组);100 μmol/L氯胺酮组(K组);10 μg/ml Dex组(D组);10 μg/ml Dex 混合100 μmol/L氯胺酮组(DK组) ......
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