翼状胬肉组织VEGF、PCNA的表达及相关性研究
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【摘要】 目的 研究血管内皮生长因子(VEGF)、增殖细胞核抗原(PCNA)在翼状胬肉组织和正常结膜组织中的表达及VEGF、PCNA相关性。方法 翼状胬肉组织标本35例，正常结膜组织标本10例。常规HE染色行组织病理学检查和VEGF、PCNA免疫组织化学检查，分别观察其组织病理学表现和VEGF、PCNA的表达情况。 结果 翼状胬肉组织VEGF和PCNA的阳性表达率是885%，正常结膜组织中VEGF和PCNA的阳性表达率分别20%、40%；VEGF在翼状胬肉和正常结膜中的表达差异存在统计学意义(P<005)；PCNA在翼状胬肉和正常结膜中的表达差异存在统计学意义(P<005)。VEGF与PCNA在翼状胬肉组织中表达呈正相关(相关系数rs= 0599，P=0000)。结论 翼状胬肉组织病理学表现以增生性病变为主，翼状胬肉组织中VEGF和PCNA的表达增加，VEGF和PCNA在翼状胬肉组织的表达呈正相关，研究结果提示VEGF和PCNA可能共同参与了翼状胬肉的发病过程。
【关键词】 翼状胬肉；VEGF；PCNA；免疫组化
相关性研究，探讨翼状胬肉与细胞增殖之间的关系,为翼状胬肉的病因和发病机制的研究提供实验依据。
1 资料与方法
11 一般资料
35例翼状胬肉组织标本取自某大学附属第一医院眼科住院患者，单眼翼状胬肉，病变部位均位于鼻侧，其中进行期患者16例，静止期患者19例。其中男19例，女
16例；年龄为31~74岁，平均年龄(5580±1180)岁。10例正常结膜组织做对照组，标本取自角膜移植供体眼球结膜，其中男8例，女2例；年龄为35~65岁，平均年龄(5530±839)岁。两组间性别、年龄经统计学处理无差异。所有病例均无其他角膜、结膜疾病。
12 方法
将切除后的翼状胬肉组织标本立即置于10%甲醛固定,分开头部和体部,石蜡包埋,连续切片，切片厚度为4 μm,进行常规HE染色结合病程镜检确定分期后行免疫组化检查。
13 统计学方法
在EXCEL中建立数据库，应用SPSS 130软件进行统计分析，年龄比较采用t检验，性别分析采用χ2检验，两组中VEGF和PCNA的差异应用MannWhitney 秩和检验，VEGF、PCNA两者关系应用Spearman等级相关分析。
2 结果
翼状胬肉组织VEGF和PCNA的阳性表达率是885%，正常结膜组织中VEGF和PCNA的阳性表达率分别20%、40%；VEGF在翼状胬肉和正常结膜中的表达差异存在统计学意义(P<005)；PCNA在翼状胬肉和正常结膜中的表达差异存在统计学意义(P<005)。VEGF与PCNA在翼状胬肉组织不同分期的表达有统计学意义(P<005)。VEGF与PCNA在翼状胬肉组织中的表达呈正相关r = 0599,P=0000。
3 讨论
31 VEGF在翼状胬肉中的表达
近年来,随着多种肿瘤相关基因在胬肉中异常表达的发现,以及胬肉的某些与肿瘤类似的生物学行为,促使研究者更倾向于认为翼状胬肉是眼表的一种异常增生性疾病,由此更加关注对胬肉发病机制的研究[2]。VEGF是目前已知在新生血管形成过程中最重要的刺激因子[3]。本实验研究结果发现，翼状胬肉组织上皮层及纤维组织均可见不同程度的增生。翼状胬肉组织上皮细胞VEGF蛋白较正常结膜增多，阳性表达主要在上皮细胞胞浆及血管内皮，呈棕黄色染色。VEGF在翼状胬肉静止期和进行期组织中的表达有明显差异具有统计学意义。结合本研究实验结果，认为翼状胬肉病变发展中可能由于VEGF活性受各种因素的影响，促进了VEGF的表达，促进内皮细胞的分裂增殖,从而促进血管的增生，使正常结膜组织过度增殖及翼状胬肉纤维血管组织向角膜的侵袭。李海燕等[4]研究报道，翼状胬肉组织上皮中有Ki67和VEGF的过度表达，提示翼状胬肉组织上皮中存在增殖调控的异常，上皮细胞可能发生了转化，上皮细胞在翼状胬肉的发生发展中可能起着关键的作用。
32 PCNA在翼状胬肉中的表达
本实验研究结果显示，PCNA在翼状胬肉组织中的阳性表达主要在细胞核，呈浅黄色或深棕色颗粒，明显高于正常结膜组织；PCNA在翼状胬肉静止期和进行期组织中的表达有明显差异，具有统计学意义，提示翼状胬肉内存在明显的细胞增殖，细胞的高增殖状态是组织增生性疾病的生物学标志,因此可将翼状胬肉视为一种增生性疾病，研究结果提示PCNA可能与翼状胬肉的发生发展有关。Ueda等[5]用免疫组化方法了解P53、P21、PCNA在日本人及突尼斯人翼状胬肉中的表达，结果发现PCNA在日本人翼状胬肉阳性率为762%，在突尼斯人翼状胬肉中阳性率为631%，两者差别不明显。颜美荣等[6] 研究发现PCNA在翼状胬肉中的高表达和Caspase3 在翼状胬肉中的低表达,提示细胞凋亡和增殖异常,可能与翼状胬肉的发生、发展有关。
33 VEGF和PCNA在翼状胬肉表达的相关性
本研究结果发现，VEGF和PCNA在翼状胬肉组织中都有阳性表达，明显高于正常结膜组织，两者之间的表达呈正相关性。随着研究的进展，VEGF和PCNA的阳性表达成为判断肿瘤诊断、恶性程度、预后的重要指标及辅助指标，VEGF和PCNA在其他疾病中的表达已经有较多的报道。周祥荣等[7]发现胃癌组织中PCNA、VEGF的阳性表达率分别为850%、683%，VEGF和PCNA在胃癌中的表达呈正相关。杨宏刚等[8]用免疫组化SP法检测了40例非小细胞肺癌的VEGF阳性表达率为725%，PCNA在非小细胞肺癌中的阳性表达率为625%，认为VEGF和PCNA可以作为评价非小细胞肺癌预后的重要指标。郑琦等[9]用免疫组化法检测30例翼状胬肉组织和30例正常结膜中VEGF与PCNA的表达，结果发现翼状胬肉中VEGF和PCNA的阳性表达均高于正常结膜，VEGF、PCNA在翼状胬肉中的高表达，提示翼状胬肉组织血管活性、增殖活性增强。与本研究结果一致，由此可见，翼状胬肉的形成与肿瘤组织的形成有相似之处，可能是VEGF和PCNA共同作用的结果。
4 小结
本实验研究结果显示，VEGF和PCNA在翼状胬肉组织中均有阳性表达，明显高于正常结膜组织；VEGF和PCNA在翼状胬肉中的表达呈正相关，PCNA随着VEGF表达强度的升高而升高，提示VEGF和PCNA可能通过不同的途径共同参与了翼状胬肉的发病过程。
参 考 文 献
[1] 惠延年.眼科学.第6版.人民卫生出版社,2004:89.
[2] Tsai YY, Chang KC, Lee H, et al Effect of p53 codon 72 polymorphism on p53 protein expression in pterygium ......
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