1.2.3AMPKα低表达的骨骼肌细胞模型的建立首先应用绿色荧光蛋白质粒电转C2C12细胞，摸索最佳的电转条件，并确定嘌呤霉素的药杀浓度。根据AMPKα基因信息(GeneID：105758)，构建shRNA沉默点，设计并合成AMPKα基因shRNA靶位点，将AMPKα基因shRNA克隆至定点整合表达载体上，转入大肠杆菌后抽提质粒测序，使质粒达到电转级别;电转C2C12细胞，根据沉默效果筛选阳性克隆及摸索好的电转条件，将靶向性oligo和shRNA定点整合载体同时电转C2C12细胞。经药杀后，realtime PCR验证确定阳性克隆数量及过表达倍数;完成AMPKα低表达C2C12细胞株建立，用于后续人参皂苷Rb1的干预研究。

    1.2.4干预方法将20 mg人参皂苷Rb1，溶解于适量DMSO中，0.22 μm滤膜过滤后作为贮存液。使用时用完全培养基进行稀释，分为5个剂量组，将终浓度分别为1、3、10、30、100 μmol/L的人参皂苷Rb1分别干预IR的C2C12细胞和AMPKα低表达的C2C12细胞 ......