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增液润燥汤对干燥综合征中老年女性性激素水平及外分泌腺功能的影响(3)
http://www.100md.com 2018年3月15日 《世界中医药》 20186
     1.7.4Tfh细胞流式细胞仪检测Tfh细胞的主要标志物是CXCR5,流式细胞仪,晨间采用表面冷冻的紫色管盖血液采集管(EDTA抗凝)采集患者血液,经过EDTAK2溶液处理后,分离剂选用人淋巴细胞(天津市灏洋生物制品科技有限责任公司),将所提取的200μL外周血单核细胞(1×106/mL),置于含10%胎牛血清(美国Thermo公司)的RPMI1640培养基(美国Thermo公司)中,加入佛波醇乙酯(PMA)、离子霉素、莫能霉素等工作液(美国eBioscience公司)并混匀,置于37℃,5%CO2;经培养箱中培养4~6h后以磷酸盐缓冲液(PBS)冲洗,离心收集细胞,加入5μL异硫氰酸荧光素标记的CXCR5(CXCR5-CD4+-FITC),操作按照购于美国eBioscience公司的流式抗体试剂盒说明书进行,采用流式细胞仪(PartecGmbH德国,产品型号:YZB/GEM946-40)检测Tfh细胞。

    1.8疗效判定标准参考《中药新药临床研究指导原则》中的有关标准,分临床痊愈、显效、有效、无效4个等级;以中医临床症状积分的减少程度作为评价标准,临床痊愈:减少程度≥95%;显效:减少程度≥70%;有效:减少程度≥30%;无效:减少程度<30%。中医临床症状积分的减少程度=[(治疗前积分-治疗后积分)÷治疗前积分]×100% ......
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