1.3 方法

    1.3.1 基因组DNA的提取 从研究人群的外周血白细胞中用全血基因DNA提取试剂盒抽提DNA作为模板。

    1.3.2 PCR实验条件 通过分别设定系列变性温度梯度、退火温度梯度、引物浓度梯度、2× Power Taq PCR Master Mix浓度梯度，最终确立最适PCR体系为：DNA模板1 μL，上、下游引物各2 μL(初浓度为10 μmo/L)，2× Power Taq PCR Master Mix 12.5 μL，加入双蒸水至25 μL。PCR扩增程序：95℃预变性5 min，之后按95℃ 45 s、58℃ 60 s、72℃ 60 s共35个循环，最后72℃延伸至5 min。

    1.3.3 RFLP 取PCR产物8 μL、20×Buffer 1.5 μL、限制性内切酶BstUI 5 U(0.5 μL)，加双蒸水至15 μL，放入水浴箱中于37℃过夜酶切(约16 h)。

    1.3.4 DNA测序 随机选取不同基因型的PCR产物送大连宝生物公司进行测序 ......