1.2 细胞培养

    U87-MG细胞使用含10%胎牛血清的DMEM高糖培养基，置于37℃培养箱(5% CO2)常规培养，细胞汇合度达90%后消化传代，常规培养7 d后进行后续实验。将U87-MG细胞分为正常对照(Control)组和ouabain(0.05、0.5、2.5、25 μmol/L)组。Control组不进行ouabain干预。

    1.3 MTT法检测细胞存活率

    U87-MG细胞以5×104个/mL的密度接种于96孔板中，每孔100 μL。常规培养24 h后，ouabain组细胞加入含不同浓度ouabain的培养基，Control组加入等体积的常规培养基，空白孔单加培养基，每组设5个复孔，继续培养24 h。之后每孔加入20% MTT，置于37℃培养箱孵育2 h，酶标仪测定490 nm处的OD值，计算细胞活力。细胞活力=(OD实验孔-OD空白孔)/(OD对照孔-OD空白孔)×100%，使用GraphPad Prism 6.0软件制作统计图。

    1.4 Western blot检测蛋白表达量

    U87-MG细胞经不同浓度ouabain干预24 h后，PBS漂洗3次，加入RIPA蛋白裂解液和PMSF蛋白酶抑制剂 ......