重组人神经生长因子治疗大鼠糖尿病周围神经病变的效果(3)
1.3.6 坐骨神经果糖及山梨醇的含量
取大鼠左侧坐骨神经，用纯水冲洗，称重，按照1根坐骨神经加1 mL纯水后匀浆，4℃下2000 r/min离心10 min，取得即匀浆上清液。取混合标准品溶液20 μL(果糖3 mg/mL、山梨醇2 mg/mL)，在80℃金属浴中氮气吹干，加入400 μL匀浆上清液复溶后，加入100 μL 10%三氟乙酸溶液，在12 000 r/min下离心10 min，取上清液300 μL，在80℃水浴中减压蒸干，依次加入0.5 mL吡啶、0.5 mL N，N-二甲基乙酰胺，1 mL乙酸酐，混匀后在90℃水浴中反应40 min，过0.45 μm滤膜后注入气相色谱仪检测。气相色谱条件：毛细管柱：Rtx-5(0.25 mm×30 mm；膜厚0.25 μm)；载气：氮气；流速：0.4 mL/min；程序升温150℃(保留2 min)，5℃/min升温至250℃，再以10℃/min升温至290℃(保留9 min)；气化室温度：280℃；检测器：氢火焰检测器；进样量1 μL[12] ......
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取大鼠左侧坐骨神经，用纯水冲洗，称重，按照1根坐骨神经加1 mL纯水后匀浆，4℃下2000 r/min离心10 min，取得即匀浆上清液。取混合标准品溶液20 μL(果糖3 mg/mL、山梨醇2 mg/mL)，在80℃金属浴中氮气吹干，加入400 μL匀浆上清液复溶后，加入100 μL 10%三氟乙酸溶液，在12 000 r/min下离心10 min，取上清液300 μL，在80℃水浴中减压蒸干，依次加入0.5 mL吡啶、0.5 mL N，N-二甲基乙酰胺，1 mL乙酸酐，混匀后在90℃水浴中反应40 min，过0.45 μm滤膜后注入气相色谱仪检测。气相色谱条件：毛细管柱：Rtx-5(0.25 mm×30 mm；膜厚0.25 μm)；载气：氮气；流速：0.4 mL/min；程序升温150℃(保留2 min)，5℃/min升温至250℃，再以10℃/min升温至290℃(保留9 min)；气化室温度：280℃；检测器：氢火焰检测器；进样量1 μL[12] ......
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