补中益气汤含药血清干扰A549/DDP生长作用的实验研究(2)
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1.7 MTT法检测最佳浓度补中益气汤含药血清对A549/DDP细胞耐DDP作用的逆转倍数
将对数生长期的A549及A549/DDP细胞，制备成浓度为105/mL的细胞悬液，接种于96孔板中，实验分组：空白对照组、最佳浓度含药血清组、最佳浓度含药血清+不同浓度DDP组，DDP的终浓度为6、12、25、50、200、400 μmol/L，每组均设4个平行孔，每孔共200 μL。加药培养48 h后取出细胞，加入5 mg/mL 的MTT溶液20 μL，再培养4 h后，倾去培养液，加入DMSO 150 μL，置摇床混匀10 min，酶标仪在波长490 nm处测每孔的A值，取平均值。根据公式计算出IR、IC50，计算评价逆转效果使用的指标逆转倍数(RF)，RF=药物IC50(不加逆转剂) /药物IC50(加逆转剂)。以上实验重复3次。
1.8 统计学方法
采用SPSS 17.0统计学软件对数据进行处理，计量资料数据用均数±标准差(x±s)表示，组间均数比较采用单因素方差分析(ANOVA)，以P < 0.05 为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 补中益气汤含药血清对A549/DDP生长状态的影响
倒置显微镜下观察发现，对照组细胞成簇生长，细胞大小基本一致，呈圆形或椭圆形，折光性较弱；而补中益气汤含药血清处理各组细胞数量减少，细胞形态发生改变，细胞体积大小不一，轮廓不规则，折光性增强。
2.2 含药血清最佳作用浓度的筛选
从不同剂量、不同浓度的含药血清对细胞的抑制率分析：含药血清作用48 h后，5%高剂量组对A549/DDP的抑制率高于5%中剂量组和5%低剂量组，并与5%空白血清组比较，差异有统计学意义(P < 0.05)；10%各剂量组与10%空白血清组比较 ......
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