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编号:12712033
维吾尔药异常黑胆质成熟剂总黄酮对增生性瘢痕成纤维细胞增殖及胶原蛋白表达的影响(2)
http://www.100md.com 2015年12月1日 《中国美容医学》 2015年第23期
     1.3.1 细胞分组:将处于对数生长期的3~6代的HFs分为:①空白对照组:加入等体积的培养液;②实验组:分别加入浓度为320、340、360、380、400μg/ml的ASMq-TF;③阳性对照组:加入浓度为250μg/ml的5-FU氟尿嘧啶(5-FU)。每组设 3个平行复孔,以便观察与检测。各组于加药48h后进行观察及实验。

    1.3.2 CCK-8法检测ASMq-TF、5-FU对细胞增殖的抑制作用:对处于对数生长期的细胞进行计数,HFs经传代后以5×103个/孔细胞数接种于96孔板中,并加入200μl含10% FBS的DMEM培养,待细胞贴壁后用无血清的DMEM饥饿过夜进行均一化处理;根据实验分组设计,加药干预细胞,每组设3个复孔。连续检测加药后第1天至第11天同一时间点的各组细胞增殖情况,于检测前4h每孔各加入20μl的CCK-8工作液,置于37℃、体积分数5%的CO2培养箱中孵育4h后用酶标仪读取各孔在490nm处光波波长的吸光值(OD值),实验重复3次 ......
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