Key words: vascular endothelial growth factor; prefabricated flap; gene therapy; adenovirus

    预构皮瓣应用中要解决的重要问题是知名血管植入预构区域后，建立新的血供系统所需时间较长。近年来，有报导一些多肽类生长因子如VEGF(Vascular endothelial growth factor, 血管内皮生长因子)、bFGF、TGF-β等[1-2]通过直接或间接刺激血管生成作用被用于促进预构皮瓣的再血管化进程，特别是VEGF能特异性地促血管内皮细胞分裂增殖、增加血管通透性,为血管内皮的迁移及基质形成创造条件，故备受研究者青睐。但生长因子蛋白半衰期短、疗效不稳定、需反复应用、副作用多，本研究应用基因治疗技术，将人VEGFcDNA 通过腺病毒载体，一次性注射于大鼠腹部预构皮瓣血管束周围软组织内，通过观察VEGF 的表达情况及对预构皮瓣再血管化进程和成活的影响，探讨腺病毒-VEGF基因重组体促进血管化和皮瓣成活的可能性。

    1材料和方法

    1.1 腺病毒-VEGF基因重组体的制备：重组复制缺陷型腺病毒pcDNA3/hVEGF165由中科院细胞所构建。将hVEGF165插入pcDNA3的EcoRI和HindIII多克隆位点,并转化DH5进行扩增，凝胶电泳证实hVEGF165已插入pcDNA3多克隆位点，测序证实hVEGF165无突变。以标准的磷酸钙共沉淀法(Promega, Inc.Kit)转染20ug pcDNA3/hVEGF165到PA317细胞，通过G418的集落筛选，扩大培养，测定包装细胞上清中病毒的滴度 ......