硫酸盐还原菌类群分离培养和ＰＣＲ分析鉴定
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摘要： [目的] 探讨分离培养和聚合酶链反应(PCR)在硫酸盐还原菌类群分析鉴定中的应用。 [方法] 采用分离培养和PCR对贵州阿哈湖沉积物中硫酸盐还原菌类群进行分析，并对分离纯化的一株硫酸盐还原菌进行鉴定。 [结果] 贵州阿哈湖沉积物硫酸盐还原菌类群为脱硫肠菌属、脱硫叶菌属和脱硫球菌-脱硫线菌-脱硫八叠菌属；纯化菌株经PCR扩增初步鉴定为脱硫叶菌属，菌株形态与鉴定结果相符。 [结论] 采用分离培养结合PCR，可以对硫酸盐还原菌类群进行分析和鉴定。
关键词：分离培养；聚合酶链反应；硫酸盐还原菌
文章编号:1006-3617(2007)01-0040-03
中图分类号:R117
文献标识码:A
硫酸盐还原菌(sulfate-reducing bacteria，SRB)是一类严格厌氧菌，其在代谢活动中可以利用硫酸盐作为电子受体并产生高浓度 H2S。研究环境中硫酸盐还原菌类群和分子生物学特征变化，对认识全球和局部区域环境的硫循环规律、生态系统对酸雨的响应机制以及重金属等环境污染物迁移转化有着重要的理论意义和实际应用价[1～3]。
硫酸盐还原菌类群分析鉴定方法主要有传统学分类[4，5]和分子生物学分类[6～8]，各有不同的优缺点。我们利用分离培养和PCR扩增对贵州阿哈湖沉积物进行了硫酸盐还原菌类群分析，并将一株纯化的硫酸盐还原菌初步鉴定为脱硫叶菌属，菌株形态学特征也符合该类群。本文目的在于优化硫酸盐还原菌分离培养条件，探讨分离培养和PCR扩增对硫酸盐还原菌类群分析和鉴定的可行性。
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 硫酸盐还原菌培养基 乳酸2.5 ml，Na2SO4 1.0 g，NH4Cl 1.0 g，CaCl2 0.1 g，K2HPO4 0.5 g，(NH4)2SO4 0.5 g，酵母膏1.0 g，L-半胱氨酸0.6 g，0.1%刃天青1 ml，FeSO4 2.5 g；硫酸盐还原菌固体培养基加入2%琼脂。
1.1.2 主要试剂 Taq DNA聚合酶、dNTP、DNA Marker和引物均为华美公司产品提供或合成 ......
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