大肠杆菌检验法分析
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大肠杆菌能产生B-葡萄糖醛酸昔酶，能把4-甲基散形酮-葡萄糖醛酸昔酶(MUG)分解为4-甲基散形酮，该分解产物在366 nm紫外光激发下，产生灰蓝色荧光，即为大肠杆菌阳性反应；如果没有产生灰蓝色荧光，则为阴性反应。基于此，采用MUG试剂为底物制成培养基，以快速检查大肠杆菌，同时设空白对照组，并与部颁方法进行比较。
1检验方法
1.1菌株大肠杆菌标准株(44102)由中国药品生物制品检定所提供，其余7株大肠杆菌由长春市药品检验所提供。
1.2供试品六味地黄丸、百合固金丸、益坤丸、牛黄上清丸、牛黄清胃丸、金匾肾气丸、银翘解毒丸、人参归脾丸、舒肝丸共9种，均由本院药房提供[1]。
1.3培养基肉汤、肉汤琼脂、胆盐乳糖(BL)增菌液、伊红美蓝(EMB)琼脂等，均按《药品卫生检验方法》制备。MUG培养基：pH 7.6～7.8，MUG 0.075 g，氯化钙0.05 g，硫酸胺5 g，磷酸二氢钾0.9 g，硫酸锰0.005 g，硫酸氢二钠6.2 g，硫酸锌0.005 g，亚硫酸钠0.04 g，硫酸镁0.1 g，蒸馏水1000 mL，氯化钠10 g，琼脂(斜面培养基用)15 g。制法：除MUG外，各成分溶解于1000 mL水中，校正pH，加人MUG溶解后，每管分装5 mL，115℃灭菌15 min。
1.4菌液配制取经36℃培养18～24 h大肠杆菌肉汤培养物，稀释成10-7(含菌50～100个/mL)备用[2]。
1.5供试液制备按部颁方法制成1∶10供试液备用。
1.6部颁方法分别加供试液各10 mL于2瓶胆盐乳糖(BL)增菌液中，其中一瓶菌液(10-7)而混匀，同置36℃培养24 h，按部颁方法检查大肠杆菌，见表1。
1.7取上述2种培养物摇匀分别取0.2 mL，接种在MUG斜面培养基和MUG液体培养基中，同置36℃培养，观察培养3、5、10、解h后的荧光反应，见表1。
2讨论
采用MUG液体培养基，较固体斜面培养基的实验反应灵敏，对认为染菌的检品，一般5～24 h能在紫外光(366 nm)下观察到很强的灰蓝色荧光，即为阳性反应，本次式样认为污染大肠杆菌的8只检品，MUC法均呈阳性，经部颁法确认无误。除大肠杆菌外，沙门氏菌，志贺氏菌株也能产生葡萄糖醛酸昔酶，能水解MUG试剂，出现阳性反应。
参考文献：
[1]中华人民共和国卫生部医政司.全国临床检验操作规程[M].2版.南京：东南大学出版社，1997.
[2]周道银.胸腔积液的细胞学检查进展[J].上海医学检验杂志，1999.
编辑/肖慧
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