不同补肾法诱导的骨髓间充质干细胞对脑梗死大鼠神经功能恢复的促进作用(2)
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参见附件。
2.6 移植后大鼠神经功能综合测评
神经功能测评方法按文献[3-5]从自发运动、轻瘫实验、角膜反射、耳道反射、痛觉、霍纳征6个方面进行，总分为18分，症状越重，得分越少。神经功能测评时间在术后3、7、14 d进行。测评标准：①自发活动：3分，四周活动，探索环境，至少到达三面墙壁；2分，活动少、迟疑、缓慢，但最终至少探索一面墙壁；1分，饲养筐内缓慢活动，不探索筐壁。②四肢对称运动(轻瘫实验)：3分，四肢对称伸展；2分，右侧肢体伸展较左侧差；1分，右侧肢体活动明显减少。③角膜反射：3分，灵敏，左右对称；2分，右侧较左侧差；1分，右侧反射缺如。④耳道反射：3分，左右对称，灵敏；2分，右侧较左侧差；1分，右侧反射缺如。⑤痛觉：3分，针刺疼痛刺激反应两侧对称灵敏；2分，右侧疼痛刺激反应较左侧差；1分，右侧疼痛刺激无反应。⑥霍纳征：3分，双眼睑等大，对称；2分，右眼睑缩小；1分，右眼睑闭合，眼球内陷。
2.7 2，3，5-氯化三苯基四氮唑染色法测定脑梗死面积
于移植后7、14 d处死大鼠，断头取脑，去除嗅球、小脑和脑干，立即将脑组织置-20 ℃冰箱20 min，取冠状面均匀切成1 mm厚脑片5～6片，将第三切片迅速置于2%TTC溶液(37 ℃)中染色30 min左右，观察染色效果。数码相机拍照。正常脑组织为红色，梗死区域脑组织为白色，用AutoCAD软件计算和测定脑组织梗死面积和总脑片面积，以脑梗死面积占总脑片面积百分数(%)表示。
2.8 脑组织神经突触素表达水平的检测
于移植后7、14 d用10%水合氯醛腹腔麻醉大鼠，手术充分暴露心脏，以9号注射针头通过左心室心尖部穿刺插管至主动脉弓，切开右心耳。先以0.9%氯化钠溶液大约120 mL快速灌流 ......
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