雷公藤单萜合酶基因TwMS的克隆及蛋白表达分析(2)
本研究首次克隆得到1条雷公藤的单萜合酶基因，并对其进行了生物信息学分析、茉莉酸甲酯(MeJA)诱导表达分析，以及IPTG 诱导蛋白表达分析等研究，为深入研究雷公藤单萜合酶基因功能以及对雷公藤植物生长发育的调控机制奠定了基础。
1 材料
1.1 雷公藤悬浮细胞
实验所用材料来源于本实验室继代保存的悬浮细胞。培养方法：在含有 0.5 mg·L-1 2，4D (2，4二氯苯氧乙酸) +0.1 mg·L-1 KT (激动素) + 0.5 mg·L-1 IBA (吲哚丁酸) 的MS 液体培养基中，于25 ℃，120 r·min-1黑暗条件下振荡培养。
1.2 菌株
实验中使用的 Escherichia coli trans 5α及E.coli BL21(DE3)购自北京全式金生物技术有限公司。
1.3 试剂及仪器
2×EasyTaq PCR SuperMix、pEASYT3 Cloning Kit 购自北京全式金生物技术有限公司；RNA 纯化试剂盒、琼脂糖凝胶 DNA回收试剂盒、质粒小提试剂盒、Fast Quant RT Kit (With gDNase) 购自天根生化科技(北京)有限公司； KAPA SYBR FAST Universal 2×qPCR MasterMix 购自 KAPA Biosystems 公司；Dnase I ......
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1 材料
1.1 雷公藤悬浮细胞
实验所用材料来源于本实验室继代保存的悬浮细胞。培养方法：在含有 0.5 mg·L-1 2，4D (2，4二氯苯氧乙酸) +0.1 mg·L-1 KT (激动素) + 0.5 mg·L-1 IBA (吲哚丁酸) 的MS 液体培养基中，于25 ℃，120 r·min-1黑暗条件下振荡培养。
1.2 菌株
实验中使用的 Escherichia coli trans 5α及E.coli BL21(DE3)购自北京全式金生物技术有限公司。
1.3 试剂及仪器
2×EasyTaq PCR SuperMix、pEASYT3 Cloning Kit 购自北京全式金生物技术有限公司；RNA 纯化试剂盒、琼脂糖凝胶 DNA回收试剂盒、质粒小提试剂盒、Fast Quant RT Kit (With gDNase) 购自天根生化科技(北京)有限公司； KAPA SYBR FAST Universal 2×qPCR MasterMix 购自 KAPA Biosystems 公司；Dnase I ......
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