正交法优选愈骨葆方的最佳水提取工艺(2)
1材料11愈骨葆方复方包含骨碎补、杜仲、续断、千年健、川芎、玄胡、细辛,所需饮片均购于广东大参林药房,由广州市番禺区何贤医院药房李艳卿副主任药师鉴定,低温干燥避光保存。
12动物新生24 h内SD大鼠乳鼠6只,雌雄兼用,每只约15 g。SPF级SD雌性大鼠30只,体重230~250 g,由广州中医药大学实验动物中心提供,许可证号SCXK(粤)20080020。
13试剂DMEM高糖培养基(Hyclone公司,批号SH30021 01B)、025%胰酶溶液(GIBCO批号25200056)、胶原酶Ⅰ(Invitrogen公司,批号17101015)、PBS缓冲液(Hyclone公司,批号SH30256 01B),β甘油磷酸钠(Sigma公司,批号BCBB4821),L维生素C(Sigma公司,批号037K02501),地塞米松(Sigma公司,批号100827),碱性磷酸酶(ALP)测定试剂盒(南京建成生物工程研究所,批号A0591)。
2方法
21成骨细胞(osteoblasts ......
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