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编号:12857618
3种桂枝汤苯丙烯类化合物对oxLDL诱导人脑微血管内皮细胞氧化应激损伤的保护作用(3)
http://www.100md.com 2016年6月15日 《中国中药杂志》2016年第12期
     125 ROS激光共聚焦扫描显微镜荧光观察 按121项下法制备消化细胞,以1×105个/mL接种Φ35 mm共聚焦小皿,每皿2 mL,置于CO2培养箱中培养。约24 h时,细胞融合率达80%左右,弃去培养液,同上进行实验分组,给药,培养24 h后,吸取上清液置EP管-80 ℃保存备用;各组细胞用PBS轻洗2次,加入终浓度10 μmol·L-1的DCFHDA 500 μL,于37 ℃培养箱孵育30 min,弃去上清,加1 mL PBS,于激光共聚焦扫描显微镜(激发波长488 nm,吸收波长525 nm)下观察细胞荧光并拍照。

    126 SOD,MDA,NO,eNOS含量测定 按121项下法制备消化细胞,以8×104个/mL接种96孔培养板,每孔2 mL,置于CO2培养箱中培养。约24 h时,细胞融合率达80%左右,弃去培养液,同上进行实验分组,给药,培养24 h后,消化收集细胞,超声波碎裂细胞,用BCA定量试剂盒检测细胞匀浆的总蛋白含量,按SOD,MDA ......
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