HPLC—MS/MS测定葛根芩连汤对大鼠肝脏细胞色素P450酶的影响(3)
取葛根素、黄芩苷、盐酸小檗碱(以小檗碱计)对照品适量，精密称定，用甲醇溶解并定容，分别制成10 mmol·L-1的对照品储备液。给药时，用Tris盐酸缓冲液稀释到相应浓度，取用。
2.2 肝微粒体孵育反应
酶反应体系100 μL，由25 mmol·L-1 MgCl2，25 mol·L-1 Tris盐酸缓冲液(pH 7.4)包括一定浓度的微粒体蛋白、混合探针底物(非那西汀、甲苯磺丁脲、右美沙芬、氯唑沙宗和睾酮)组成。37 ℃水浴预孵育5 min后，加入NADPH启动反应(整个孵育体系控制有机溶剂在1%以内)震荡孵育一定时间后，用等体积含有200 μg·L-1罗格列酮(200 mg·L-1 ......
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2.2 肝微粒体孵育反应
酶反应体系100 μL，由25 mmol·L-1 MgCl2，25 mol·L-1 Tris盐酸缓冲液(pH 7.4)包括一定浓度的微粒体蛋白、混合探针底物(非那西汀、甲苯磺丁脲、右美沙芬、氯唑沙宗和睾酮)组成。37 ℃水浴预孵育5 min后，加入NADPH启动反应(整个孵育体系控制有机溶剂在1%以内)震荡孵育一定时间后，用等体积含有200 μg·L-1罗格列酮(200 mg·L-1 ......
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