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编号:12642230
三七总皂苷对大鼠肝脏药物代谢酶酶活性、mRNA及蛋白表达的影响(2)
http://www.100md.com 2014年10月1日 中国中药杂志 2014年第19期
     测定PNS对CYP2E1酶活性的影响:参照Kim等[5]的方法并做了部分改动。将底物对硝基苯酚(490 μmol·L-1)和维生素C(1 mmol·L-1)与1 mg肝微粒体混合,加入PBS(pH 6.8)至终体积为1 mL,加入NADPH(1 mmol·L-1),在37 ℃环境中启动反应,产物为对硝基邻苯二酚,反应持续10 min,加入0.6 mol·L-1的高氯酸终止反应,离心去除沉淀。在波长为546 nm的条件下测定其吸光度。

    测定PNS对CYP3A酶活性的影响:参照Bray等[6]红霉素N-去甲基化分析方法,并做了部分改动。将底物红霉素(1 mmol·L-1)与1 mg肝微粒体混合,加入PBS(pH 7.4)至终体积为1 mL,加入NADPH(1 mmol·L-1)在37 ℃环境中启动反应,产物为甲醛,反应持续30 min。加入0.33 mL的15% ZnSO4和0.33 mL的饱和氢氧化钡终止反应 ......
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