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编号:13126680
酵母提取物诱导欧洲花楸悬浮细胞合成次生代谢产物的机制探究(2)
http://www.100md.com 2014年6月1日 《中国中药杂志》 2014年第11期
     2.5 细胞悬浮液pH测定 采用分析型酸度计直接测定培养基中的pH,每个处理设置4个生物学重复。

    2.6 细胞中可溶性蛋白质含量的测定 用考马斯亮蓝G-250法测定[7],以牛血清蛋白作标准曲线,单位为mg·g-1(鲜重),每个处理设置4个生物学重复。

    2.7 细胞外Ca2+流变化的测定 采用非损伤微测技术(NMT)[8],用多聚赖氨酸玻片固定细胞,加入测试液稳定15 min,在显微镜下找到直径约200 μm的细胞簇,测定时间为10 min,每个处理设置5个生物学重复。

    3 结果与分析

    3.1 酵母提取物对欧洲花楸悬浮细胞次生代谢产物的影响 细胞经YE处理后,在其细胞提取物中检测到5种联苯类化合物,分别推断为2′-OH-aucuparin(1),3,5-dihydroxy-biphenyl(2),noraucuparin(3),aucuparin(4),eriobofuran(5)。随着诱导时间的延长,SASC合成的联苯类化合物总量呈上升趋势,但5种联苯类化合物在细胞中的含量则分别呈现出不同的积累规律见图1 ......
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