清心开窍方含药脑脊液对谷氨酸致PC12细胞损伤的保护机制(2)
1.6 RT-PCR检测方法 组织中总RNA的提取参考文献方法[6]。所得RNA样品,可立即使用或置-80 ℃冰箱保存。RNA纯度鉴定:取5 μL RNA溶液,加DEPC水稀释至60 μL,以DEPC水作为空白对照,读取紫外分光光度计260,280 nm波长下的吸光度,计算其A260/A280。
RNA浓度测定:取5 μL RNA溶液,加DEPC水稀释至60 μL,枪头混匀,以DEPC水作为空白对照,读取紫外分光光度计260 nm波长下的吸光度。按公式计算RNA浓度:RNA(g·L-1)=A260×40×60/5/1 000。
RNA完整性鉴定:应用1%甲醛变性的琼脂糖电泳鉴定RNA完整性。
一步法RT-PCR扩增:参照一步法RT-PCR试剂盒说明进行操作。Bax(扩增片段376 bp):上游5′-TGGTTGCCCTTTTCTACTTTG-3′ ......
您现在查看是摘要页,全文长 4033 字符。