2.2 Doil-aFGF融合基因的合成 分别以PUC19-Doil质粒和PUC19-aFGF质粒为模板(实验室保存)，利用Doil1，Doilmid和aFmid，aF2特异性引物PCR扩增大豆油体蛋白Doil基因和aFGF基因。50 μL PCR 反应体系中加2×PCR 反应缓冲液25 μL， 引物Doil1/Doilmid和aFmid/aF2各0.5 μL， Prime star DNA聚合酶0.5 μL， 模板pUC19-DoilS和pUC19-aFGF 1 μL， dNTP 4 μL，去离子水18.5 μL。PCR反应的程序为94 ℃预变性4 min， 94 ℃变性30 s，55 ℃退火30 s， 72 ℃延伸42 s， 共28个循环， 最后72 ℃延伸5 min。

    然后以扩增出的基因Doil和aFGF基因为模板，Doil1和aF2为引物，进行重叠PCR扩增，50 μL PCR 反应体系中加2×PCR 反应缓冲液25 μL， 引物Doil1 1 μL，引物aF2 1 μL， Prime star DNA聚合酶0.5 μL ......