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编号:13164195
抗热毒宁注射液栀子蛋白单克隆抗体的研制与鉴定(1)
http://www.100md.com 2013年5月15日 《中国中药杂志》 2013年第10期
     [摘要]利用栀子脂溶性蛋白作为免疫原免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞进行融合,通过间接ELISA方法筛选获得1株抗栀子蛋白的单克隆抗体2H8。该单克隆抗体亚类鉴定为IgG2b,轻链为Kappa链。2H8腹水效价为1∶204 800。Western blot试验证实,2H8能与栀子蛋白反应,识别相对分子质量为58.5 kDa左右的特异性蛋白质条带。以2H8腹水作为一抗建立了斑点酶联免疫吸附试验方法(Dot,ELISA),最小检出量为19.5 ng。本研究为快速检测热毒宁注射液蛋白的试剂盒的研制奠定了基础。

    [关键词]热毒宁;蛋白;单克隆抗体;斑点酶联免疫吸附试验

    热毒宁注射液处方由青蒿、栀子、金银花组成,具清热、疏风、解毒之功能,临床上用于上呼吸道感染(外感风热证)所致的高热、微恶风寒、头身痛、咳嗽、痰黄等。由于中药注射剂具有生物提取物的特征,在提取的过程中不可避免地带来一些生物大分子, 比如植物蛋白质、核酸等。蛋白质是抗原性最强的常见物质, 而且相对分子质量越大抗原性越强 ......
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