2.6 Dot，ELISA方法的建立 在NC膜上用铅笔划1 cm×1 cm的小格， pH 7.4的PBS缓冲液饱和0.5 h，干燥。以银杏水溶性蛋白作为阴性对照，将栀子脂溶性蛋白用PBS从1.25 g·L^-1倍比稀释至0.004 87 mg·L^-1，分别取1 μL点到膜片正中，37 ℃恒温烘箱中包被，直至干燥。取出膜片放入含5%脱脂乳的TBST中37 ℃封闭1.5 h，TBST清洗3次，每次5 min。按Dot，ELISA常规操作进行一抗、酶标二抗最适浓度、最佳显色时间及稳定性、重复性试验。结果判定：反应膜片呈现均匀棕褐色斑点，与背景反差极强烈者判为强阳性；与背景反差较强烈者判为较强阳性；与背景反差强烈者为阳性；着色淡，与背景反差小者为弱阳性。以出现斑点的最高稀释度为待检血清的抗体效价，同时设立阴性对照^[5，8]。

    3 结果

    3.1 栀子蛋白制备及SDS，PAGE 栀子蛋白经液氮研磨、预处理试剂盒处理后 ......