2.4 测序 PCR产物委托上海生工、博迈德生物进行测序，利用DNASTAR和测序峰图结果分析软件Chromas 2.1对测序结果进行序列拼接，最后得到乌龟线粒体基因组序列。

    3 数据处理

    收集到的样品经过测序，峰图利用Contig Express，Dnaman，Dnastar等软件拼接并辅以手工校正，去除引物区，获得长度为651～706 bp的样品序列。然后在NCBI 中用BLAST 相似性搜索，确保得到的COI序列是本研究的目的序列。最后将所有序列用软件Molecular Evolutionary Genetics Analysis(MEGA) 5.0 比对并进行特异位点、种间变异等分析，并构建NJ( 邻接) 系统聚类树，同时利用Bootstrap (1 000次重复) 检验各分支的支持率。

    4 结果与分析

    4.1 COI序列长度及序列差异 研究所用的22个活体样品的COI片段序列的长度范围为651～706 bp ......