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编号:13555399
白鲜皮多糖硫酸酯化修饰及抗银屑病作用研究(3)
http://www.100md.com 2019年4月15日 《中国药房》 20198
     2.1.2 DDP-Ⅲ的分离与纯化 取“2.1.1”项下DDP 10 g,经DEAE-52阴离子交换纤维素柱,依次用水及0.1、0.3、0.5、0.7 mol/L氯化钠溶液以1 mL/min的流速进行梯度洗脱,每梯度收集30管,每管10 mL。采用硫酸苯酚法[9]以紫外-可见分光光度计于490 nm波长处检测每管吸光度(A490 nm)。以各管编号为横坐标、A490 nm值为纵坐标绘制洗脱曲线(见图1A)。合并同梯度洗脱液,经减压浓缩、透析脱盐、冷冻干燥后,得两个组分即DDP-Ⅰ(水洗脱部分)和DDP-Ⅱ(0.3 mol/L氯化钠溶液洗脱部分),得率分别为43.6%和12.2%(即DDP-Ⅰ、DDP-Ⅱ与DDP的质量百分比)。

    取收率较高的DDP-Ⅰ适量,经Sephadex G-100葡聚糖凝胶柱,用水以0.5 mL/min的流速洗脱,自动收集洗脱液,每管10 mL。按上述硫酸苯酚法[9]检测每管的A490 nm值,并同法绘制洗脱曲线(见图1B)。合并A490 nm值较高的洗脱液,经减压浓缩、透析、冷冻干燥后 ......
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