丙硫苯咪唑治疗肝腹部囊型包虫病的研究
作者：温浩 姚秉礼 邹培范 吕健
单位：(新疆医学院第一附属医院普外科*)
关键词：丙硫苯咪唑；包虫病；药代动力学
中华医学杂志900115
提要 报告口服丙硫苯咪唑(每天20mg/kg)治疗59例肝腹部囊型包虫病与80例单纯手术对照的疗效观察，84只C57BL/6J小鼠药物治疗(每天200mg/kg)的动物实验，以及高效液相色谱法对12例肝包虫病患者血液、胆汁和包虫囊液中药物浓度监测结果，对丙硫苯咪唑治疗肝腹部囊型包虫病的疗效作出综合性评价。研究结果表明，丙硫苯咪唑是一种吸收好、副作用小、疗效较为明显的抗包虫药物。
应用化学合成药物治疗包虫病已成为近年来研究的重要课题[1]。本研究试图通过用丙硫苯咪唑治疗59例肝腹部囊型包虫病(Cystic echinococcosis)与80例对照组的对比观察，并且结合动物实验和高效液相色谱法(HPLC)药物监测结果，对丙硫苯咪唑(albendazole)治疗肝腹部囊型包虫病的疗效做出综合性评价。
, 百拇医药
材料和方法
一、药物
丙硫苯咪唑胶囊和粉剂，杭州药厂生产，批号860605、860609。
二、治疗病例和动物
1. 用药并手术组：按规定疗程用药后行手术的肝囊型包虫病21例，其中，男10例，女11例，年龄3.5～64岁，平均23岁，共计34个囊肿(单囊型22个，多子囊型12个)；对照组为单纯手术的肝囊型包虫病80例，其中，男38例，女42例，年龄2.5～66岁，平均25岁，共计111个囊肿(单囊型84个，多子囊型27个)。
2. 单纯用药组：不愿或不适宜行手术治疗的肝腹部囊型包虫病38例，其中男19例，女19例，12岁及下儿童组11例，合并腹腔包虫者7例。
3. 动物：100只C57BL/6J小鼠，雌性，鼠龄25～30天，体重13～15g。取人体囊型包虫原头蚴给小鼠腹腔接种(2000个原头蚴/只)，饲养100天备用。
, 百拇医药
三、治疗方法
病人：丙硫苯咪唑胶囊每天20mg/kg分早晚两次口服，每个疗程30天，间歇10天，一般用药3个疗程，复杂包虫病可用药10个疗程。动物：用自制灌胃器给小鼠灌注丙硫苯咪唑悬浊液每天200mg/kg，每个疗程28天，间歇7天，用药两个疗程；对照组小鼠同法灌注蒸镏水。
四、观察指标
1. 用药并手术组：(1)影象学(B超或CT)和手术观察包虫内囊破裂率；(2)原头蚴伊红(0.1%)着色率；(3)原头蚴小鼠腹腔接种的感染率；(4)生发组织和角质层病理组织学观察并按病理损伤程度分为3级。0级：生发组织和角质层正常或基本正常；Ⅰ级：变性改变为主；Ⅱ级：坏死性改变为主[2]。
2. 单纯用药组：丙硫苯咪唑疗效判断标准：(1)治愈：临床症状明显缓解或消失，影象学检查(B超或CT)显示包虫囊肿纤维化、实变、钙化甚至消失；(2)改善：临床症状缓解，影象学检查包虫囊肿变形和缩小(其直径缩小至少2cm以上)，或部分钙化；(3)无效：囊肿的大小或形态均无变化，甚至继续增大，临床症状恶化[3]。
, 百拇医药
3. 动物：(1)每只小鼠体内包虫囊肿的最大直径和囊总重量；(2)观察小鼠包虫生发组织和角质层病理形态并按损伤程度分为3级。
五、统计方法
率用x2检验；均数用U检验；等级资料(病理损伤分级和原头蚴伊红着色率)用Ridit值检验。
六、药物监测
应用LC-4A型高效液相色谱仪(日本制造)，选用硅胶色谱柱，正己烷、氯仿、甲醇为流动相，检测波长292nm，甲苯咪唑为内标物，醋酸乙酯为提取剂，测定了12例肝囊型包虫病患者血液、包虫囊液和胆汁中丙硫苯咪唑主要代谢产物亚砜的浓度[4，5]。
结 果
一、用药并手术组
, http://www.100md.com
手术所见用药组包虫囊多呈塌陷状态，内囊菲薄、溃破，22个单囊型囊中破裂17个，内囊破裂率77.3%。取其中13例原头蚴进行再感染试验，13组小鼠(每组15只)中仅有1组感染，组感染率7.7%。单纯手术组多数包虫囊张力高，内囊色白新鲜、厚薄均匀，84个单囊型囊中破裂15个，内囊破裂率17.9%，对其中7例的原头蚴也行再感染试验，7组小鼠均受感染，组感染率为100%。
我们将原头蚴伊红着色率(0～100%)分7个等级比较，以100%的着色率为例：用药组22个单囊型囊中有12个囊(54.5%)，12个多子囊型囊中有10个囊(83.3%)；单纯手术组则相应在84个囊中有2个囊(2.4%)，在27个囊中有11个囊(40.7%)。另将包虫囊壁病理损伤程度分等级(0～Ⅱ)比较，仅以达到Ⅱ级病理损伤为例：用药组22个单囊型囊中有17个囊(77.3%)，12个多子囊型囊肿中有10个囊(88.3%)；单纯手术组则相应在84个囊中有10个囊(11.9%)，在27个囊中有13个囊(48.1%)。上述4项观察指标经统计学处理P值均小于0.01，表明用药并手术组与单纯手术组的统计指标差异有非常显著意义。
, 百拇医药
二、单纯用药组
38例患者按规定方法治疗，3个月随访1次，至今随访期1.5～3年(表1)
表1 单用丙硫苯咪唑治疗肝腹部囊型包虫病患者结果 分型
倒数
倒数(%)
治愈
改善
无效
单发单囊型
17
1(5.9)
13(76.5)
, 百拇医药
3(17.6)
多发单囊型
8
4(50)
3(37.5)
1(12.5)
多子囊型
13
3(23)
5(38.5)
5(38.5)
合计
38
, 百拇医药
8(21.1)
21(55.3)
9(23.7)
三、动物实验治疗结果(表2)表2 用药组和对照组C57BL/6J小鼠包虫囊仲的比较
鼠数(只)
±S
囊壁病理损伤数(%)
包虫囊肿最大直径 (mm)
包虫囊肿总重量(mg)
0
Ⅰ
, 百拇医药
Ⅱ
用药组
42
1.3±1.1
34.6±74.6
3(14.3)
14(66.7)
4(19.0)
对照组
42
4.8±3.0
191.3±332.9
14(66.7)
, http://www.100md.com
5(23.8)
2(9.5)
P值
<0.01
<0.01
<0.01
注：1. 100只小鼠中未感染包虫8只 自然死亡5只，灌注药物操作不当致死3只；
2. 分别从两的42只小鼠中随机取21只小鼠体内包虫的囊壁做病理组织切片(6～8μm，HE染色)
四、HPLC药物监测结果
12例囊型包虫病患者血尿常规、肝肾功能正常，按规定方法口服丙硫苯咪唑(每天20mg/kg)至第7天手术中同时取血液、包虫囊液和胆汁测定丙硫苯咪唑含量，结果见表3
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表3 12例肝囊型包虫病手术中血液、包虫囊液、胆汁中丙硫苯咪唑亚砜的含量(μg/L) 例号
丙硫苯咪唑亚砜(μg/L)
血液
包虫囊液
胆囊胆汁
胆总管胆汁
1
1226
343
1617…
2
1737
, 百拇医药
492
1337…
3
642
550
1274…
4
912
240
531…
5
1303
549
, http://www.100md.com
7448
2000
6
1137
578
2017
1073
7
774
380
1447…
8
1019
, http://www.100md.com
578
3279…
9
1029
325
2130…
10
1639
255
1662…
11
509
318
, http://www.100md.com
448…
12
962
318
758…
±S
1074±337
411±130
2000±1883
1537±656
讨 论
一、丙硫苯咪唑的抗包虫作用
, http://www.100md.com
在手术病例中，内囊破裂率(77.3%)明显高于对照组。在动物实验中用药组小鼠包虫囊肿最大直径的平均值明显小于对照组，其囊肿总重量的平均值也明显轻于对照组。结果表明丙硫苯咪唑可抑制包虫囊生长，并致使包虫囊破裂。经病理组织学观察，用药手术组中单囊和多子囊型囊达到Ⅱ级损伤数量所占比率明显高于单纯手术组。小鼠实验的病理观察结果用药组包虫囊的病理损伤程度和数量均超过对照组(表2)。因此，可以认为丙硫苯咪唑具有破坏包虫生发组织和角质层的作用，并能加速包虫囊的变性或坏死性改变的进程。
在观察药物对原头蚴作用时，以原头蚴伊红着色率100%(一般可认为是全部死亡的标志)为标准进行比较，用药并手术组中达到该标准包囊明显高于单纯手术组。另对这两组病例的原头蚴进行小鼠再感染试验，用药小鼠的组感染率则明显低于对照组，表明该药物可杀伤原头蚴或使原头蚴丧失再感染能力。
二、丙硫苯咪唑治疗包虫病的临床分析
综合59例临床治疗结果，我们体会影响药效的因素有：病程长短、囊肿体积、囊壁厚薄、囊肿类型、包虫部位等。病程短、囊壁薄、体积小、单囊型以及腹腔包虫囊肿利于药物向包虫囊渗透、吸收，药物容易在囊液中积聚较高水平，直接损伤生发组织和原头蚴，且体积小、囊壁薄的包虫容易塌陷，囊液易于吸收，继而发生纤维化与实变。
, 百拇医药
三、HPLC临床药物监测结果分析
测得12例肝包虫患者的丙硫苯咪唑亚砜浓度由高至低依次为胆囊胆汁、胆总管胆汁、血液以及包虫囊液(表3)。在包虫囊液中丙硫苯咪唑亚砜高于492μg/L的共有5例，其囊壁病理损伤均达Ⅱ级，并且原头蚴着色率也达100%。而丙硫苯咪唑亚砜低于225μg/L的也有5例，其囊壁病理损伤多为Ⅰ级，还可见部分存活的原头蚴。Chinnery等[6]报告原头蚴体外培养药物试验，丙硫苯咪唑亚砜浓度500μg/L以上可明显杀伤原头蚴，这与我们观察结果相一致。另据Saimot等[7]报告每天用丙硫苯咪唑10～14mg/kg治疗人体囊型包虫病并测得血中丙硫苯咪唑亚砜浓度600～1000μg/L，明显低于本实验测定结果。作者认为丙硫苯咪唑亚砜在包虫囊液中浓度水平与药物的抗包虫作用相关，是影响药效的最重要因素，增大用药剂量治疗包虫病具有一定临床意义。
综合研究结果表明丙硫苯咪唑是一种低毒、有效的治疗包虫病药物，尤其对于手术后多次复发或不能耐受手术者药物治疗尤为重要[8]。
, http://www.100md.com
参考文献
1. Davis A, et al. Multicentre clinical trials of benzimidazolecarbamates in human echinococcosis. Bull WHO 1986; 64:383.
2. 刘瑾厚，等.细粒棘球蚴本身的组织损伤与人体的局部组织反应.中华病理学杂志 1984；13：295.
3. Pawlowski ZS, et al. Chemotherapy of human echinococcosis. Ponencias XIII Congreso Intermocional de Hidtidologia. Madrid-Espana 1985; 346-347.
4. Meulemans A, et al. High performance liquid chromatography of albendzole and its sulfoxide metabolite in human organs and fluids during hydatidosis. J Liq chromatogr 1984; 7:569.
, 百拇医药
5. 温浩， 等. 高效液相色谱法在丙硫咪唑药物监测中的应用.新疆医学院学报 1988；11：198.
6. Chinnery JB, Morris DL, Effects of albendazole sulphoxide on viability of hydatid protoscoleces in vitro. Trans R Soc Trop Med Hyg 1986; 80:815.
7. Saimot AG, et al. Albendazole as a potential treatment for human hydatidosis. Lancet 1983; 2:652.
8. 刘约翰. 寄生虫病化学治疗.第一版.重庆:西南师范大学出版社,1988:353-355.
*乌鲁木齐，邮政编码 830054
(1988年12月30日收稿 1989年7月16日修回), http://www.100md.com
单位：(新疆医学院第一附属医院普外科*)
关键词：丙硫苯咪唑；包虫病；药代动力学
中华医学杂志900115
提要 报告口服丙硫苯咪唑(每天20mg/kg)治疗59例肝腹部囊型包虫病与80例单纯手术对照的疗效观察，84只C57BL/6J小鼠药物治疗(每天200mg/kg)的动物实验，以及高效液相色谱法对12例肝包虫病患者血液、胆汁和包虫囊液中药物浓度监测结果，对丙硫苯咪唑治疗肝腹部囊型包虫病的疗效作出综合性评价。研究结果表明，丙硫苯咪唑是一种吸收好、副作用小、疗效较为明显的抗包虫药物。
应用化学合成药物治疗包虫病已成为近年来研究的重要课题[1]。本研究试图通过用丙硫苯咪唑治疗59例肝腹部囊型包虫病(Cystic echinococcosis)与80例对照组的对比观察，并且结合动物实验和高效液相色谱法(HPLC)药物监测结果，对丙硫苯咪唑(albendazole)治疗肝腹部囊型包虫病的疗效做出综合性评价。
, 百拇医药
材料和方法
一、药物
丙硫苯咪唑胶囊和粉剂，杭州药厂生产，批号860605、860609。
二、治疗病例和动物
1. 用药并手术组：按规定疗程用药后行手术的肝囊型包虫病21例，其中，男10例，女11例，年龄3.5～64岁，平均23岁，共计34个囊肿(单囊型22个，多子囊型12个)；对照组为单纯手术的肝囊型包虫病80例，其中，男38例，女42例，年龄2.5～66岁，平均25岁，共计111个囊肿(单囊型84个，多子囊型27个)。
2. 单纯用药组：不愿或不适宜行手术治疗的肝腹部囊型包虫病38例，其中男19例，女19例，12岁及下儿童组11例，合并腹腔包虫者7例。
3. 动物：100只C57BL/6J小鼠，雌性，鼠龄25～30天，体重13～15g。取人体囊型包虫原头蚴给小鼠腹腔接种(2000个原头蚴/只)，饲养100天备用。
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三、治疗方法
病人：丙硫苯咪唑胶囊每天20mg/kg分早晚两次口服，每个疗程30天，间歇10天，一般用药3个疗程，复杂包虫病可用药10个疗程。动物：用自制灌胃器给小鼠灌注丙硫苯咪唑悬浊液每天200mg/kg，每个疗程28天，间歇7天，用药两个疗程；对照组小鼠同法灌注蒸镏水。
四、观察指标
1. 用药并手术组：(1)影象学(B超或CT)和手术观察包虫内囊破裂率；(2)原头蚴伊红(0.1%)着色率；(3)原头蚴小鼠腹腔接种的感染率；(4)生发组织和角质层病理组织学观察并按病理损伤程度分为3级。0级：生发组织和角质层正常或基本正常；Ⅰ级：变性改变为主；Ⅱ级：坏死性改变为主[2]。
2. 单纯用药组：丙硫苯咪唑疗效判断标准：(1)治愈：临床症状明显缓解或消失，影象学检查(B超或CT)显示包虫囊肿纤维化、实变、钙化甚至消失；(2)改善：临床症状缓解，影象学检查包虫囊肿变形和缩小(其直径缩小至少2cm以上)，或部分钙化；(3)无效：囊肿的大小或形态均无变化，甚至继续增大，临床症状恶化[3]。
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3. 动物：(1)每只小鼠体内包虫囊肿的最大直径和囊总重量；(2)观察小鼠包虫生发组织和角质层病理形态并按损伤程度分为3级。
五、统计方法
率用x2检验；均数用U检验；等级资料(病理损伤分级和原头蚴伊红着色率)用Ridit值检验。
六、药物监测
应用LC-4A型高效液相色谱仪(日本制造)，选用硅胶色谱柱，正己烷、氯仿、甲醇为流动相，检测波长292nm，甲苯咪唑为内标物，醋酸乙酯为提取剂，测定了12例肝囊型包虫病患者血液、包虫囊液和胆汁中丙硫苯咪唑主要代谢产物亚砜的浓度[4，5]。
结 果
一、用药并手术组
, http://www.100md.com
手术所见用药组包虫囊多呈塌陷状态，内囊菲薄、溃破，22个单囊型囊中破裂17个，内囊破裂率77.3%。取其中13例原头蚴进行再感染试验，13组小鼠(每组15只)中仅有1组感染，组感染率7.7%。单纯手术组多数包虫囊张力高，内囊色白新鲜、厚薄均匀，84个单囊型囊中破裂15个，内囊破裂率17.9%，对其中7例的原头蚴也行再感染试验，7组小鼠均受感染，组感染率为100%。
我们将原头蚴伊红着色率(0～100%)分7个等级比较，以100%的着色率为例：用药组22个单囊型囊中有12个囊(54.5%)，12个多子囊型囊中有10个囊(83.3%)；单纯手术组则相应在84个囊中有2个囊(2.4%)，在27个囊中有11个囊(40.7%)。另将包虫囊壁病理损伤程度分等级(0～Ⅱ)比较，仅以达到Ⅱ级病理损伤为例：用药组22个单囊型囊中有17个囊(77.3%)，12个多子囊型囊肿中有10个囊(88.3%)；单纯手术组则相应在84个囊中有10个囊(11.9%)，在27个囊中有13个囊(48.1%)。上述4项观察指标经统计学处理P值均小于0.01，表明用药并手术组与单纯手术组的统计指标差异有非常显著意义。
, 百拇医药
二、单纯用药组
38例患者按规定方法治疗，3个月随访1次，至今随访期1.5～3年(表1)
表1 单用丙硫苯咪唑治疗肝腹部囊型包虫病患者结果 分型
倒数
倒数(%)
治愈
改善
无效
单发单囊型
17
1(5.9)
13(76.5)
, 百拇医药
3(17.6)
多发单囊型
8
4(50)
3(37.5)
1(12.5)
多子囊型
13
3(23)
5(38.5)
5(38.5)
合计
38
, 百拇医药
8(21.1)
21(55.3)
9(23.7)
三、动物实验治疗结果(表2)表2 用药组和对照组C57BL/6J小鼠包虫囊仲的比较
鼠数(只)
±S
囊壁病理损伤数(%)
包虫囊肿最大直径 (mm)
包虫囊肿总重量(mg)
0
Ⅰ
, 百拇医药
Ⅱ
用药组
42
1.3±1.1
34.6±74.6
3(14.3)
14(66.7)
4(19.0)
对照组
42
4.8±3.0
191.3±332.9
14(66.7)
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5(23.8)
2(9.5)
P值
<0.01
<0.01
<0.01
注：1. 100只小鼠中未感染包虫8只 自然死亡5只，灌注药物操作不当致死3只；
2. 分别从两的42只小鼠中随机取21只小鼠体内包虫的囊壁做病理组织切片(6～8μm，HE染色)
四、HPLC药物监测结果
12例囊型包虫病患者血尿常规、肝肾功能正常，按规定方法口服丙硫苯咪唑(每天20mg/kg)至第7天手术中同时取血液、包虫囊液和胆汁测定丙硫苯咪唑含量，结果见表3
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表3 12例肝囊型包虫病手术中血液、包虫囊液、胆汁中丙硫苯咪唑亚砜的含量(μg/L) 例号
丙硫苯咪唑亚砜(μg/L)
血液
包虫囊液
胆囊胆汁
胆总管胆汁
1
1226
343
1617…
2
1737
, 百拇医药
492
1337…
3
642
550
1274…
4
912
240
531…
5
1303
549
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7448
2000
6
1137
578
2017
1073
7
774
380
1447…
8
1019
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578
3279…
9
1029
325
2130…
10
1639
255
1662…
11
509
318
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448…
12
962
318
758…
±S1074±337
411±130
2000±1883
1537±656
讨 论
一、丙硫苯咪唑的抗包虫作用
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在手术病例中，内囊破裂率(77.3%)明显高于对照组。在动物实验中用药组小鼠包虫囊肿最大直径的平均值明显小于对照组，其囊肿总重量的平均值也明显轻于对照组。结果表明丙硫苯咪唑可抑制包虫囊生长，并致使包虫囊破裂。经病理组织学观察，用药手术组中单囊和多子囊型囊达到Ⅱ级损伤数量所占比率明显高于单纯手术组。小鼠实验的病理观察结果用药组包虫囊的病理损伤程度和数量均超过对照组(表2)。因此，可以认为丙硫苯咪唑具有破坏包虫生发组织和角质层的作用，并能加速包虫囊的变性或坏死性改变的进程。
在观察药物对原头蚴作用时，以原头蚴伊红着色率100%(一般可认为是全部死亡的标志)为标准进行比较，用药并手术组中达到该标准包囊明显高于单纯手术组。另对这两组病例的原头蚴进行小鼠再感染试验，用药小鼠的组感染率则明显低于对照组，表明该药物可杀伤原头蚴或使原头蚴丧失再感染能力。
二、丙硫苯咪唑治疗包虫病的临床分析
综合59例临床治疗结果，我们体会影响药效的因素有：病程长短、囊肿体积、囊壁厚薄、囊肿类型、包虫部位等。病程短、囊壁薄、体积小、单囊型以及腹腔包虫囊肿利于药物向包虫囊渗透、吸收，药物容易在囊液中积聚较高水平，直接损伤生发组织和原头蚴，且体积小、囊壁薄的包虫容易塌陷，囊液易于吸收，继而发生纤维化与实变。
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三、HPLC临床药物监测结果分析
测得12例肝包虫患者的丙硫苯咪唑亚砜浓度由高至低依次为胆囊胆汁、胆总管胆汁、血液以及包虫囊液(表3)。在包虫囊液中丙硫苯咪唑亚砜高于492μg/L的共有5例，其囊壁病理损伤均达Ⅱ级，并且原头蚴着色率也达100%。而丙硫苯咪唑亚砜低于225μg/L的也有5例，其囊壁病理损伤多为Ⅰ级，还可见部分存活的原头蚴。Chinnery等[6]报告原头蚴体外培养药物试验，丙硫苯咪唑亚砜浓度500μg/L以上可明显杀伤原头蚴，这与我们观察结果相一致。另据Saimot等[7]报告每天用丙硫苯咪唑10～14mg/kg治疗人体囊型包虫病并测得血中丙硫苯咪唑亚砜浓度600～1000μg/L，明显低于本实验测定结果。作者认为丙硫苯咪唑亚砜在包虫囊液中浓度水平与药物的抗包虫作用相关，是影响药效的最重要因素，增大用药剂量治疗包虫病具有一定临床意义。
综合研究结果表明丙硫苯咪唑是一种低毒、有效的治疗包虫病药物，尤其对于手术后多次复发或不能耐受手术者药物治疗尤为重要[8]。
, http://www.100md.com
参考文献
1. Davis A, et al. Multicentre clinical trials of benzimidazolecarbamates in human echinococcosis. Bull WHO 1986; 64:383.
2. 刘瑾厚，等.细粒棘球蚴本身的组织损伤与人体的局部组织反应.中华病理学杂志 1984；13：295.
3. Pawlowski ZS, et al. Chemotherapy of human echinococcosis. Ponencias XIII Congreso Intermocional de Hidtidologia. Madrid-Espana 1985; 346-347.
4. Meulemans A, et al. High performance liquid chromatography of albendzole and its sulfoxide metabolite in human organs and fluids during hydatidosis. J Liq chromatogr 1984; 7:569.
, 百拇医药
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*乌鲁木齐，邮政编码 830054
(1988年12月30日收稿 1989年7月16日修回), http://www.100md.com