高效液相色谱法测定雷登泰口服液中愈创木酚甘油醚、盐酸伪麻黄碱、氢溴酸右美沙芬的含量
作者：李永庆 田子新 赵文 朱霁虹
单位：李永庆 田子新 赵文 朱霁虹(中国药品生物制品检定所 北京 100050)
关键词：高效液相色谱法；愈创木酚甘油醚；盐酸伪麻黄碱；氢溴酸右美沙芬
药物分析杂志000208 摘要 目的：采用高效液相色谱外标法测定雷登泰口服液中愈创木酚甘油醚、盐酸伪麻黄碱、氢溴酸右美沙芬的含量。方法：色谱柱为Spherisorb C8 5 μm 4.6 mm×250 mm，流动相为0.002 5 mol.L-1己烷磺酸甲醇溶液-水(含2%三乙胺)-3 mol.L-1磷酸(1.4∶1∶0.063)，紫外检测器，检测波长257 nm。结果：愈创木酚甘油醚进样量在2.0～10.0 μg，盐酸伪麻黄碱在0.3～1.5 μg，氢溴酸右美沙芬在0.15～0.65 μg范围内与峰面积呈良好的线性关系，相关系数依次为0.998 6，0.999 9，0.999 9，回收率依次为100.8%，100.5%，99.69%。结论：本法精密度好，结果准确可靠。
, 百拇医药
HPLC Determination of Guaifenesin,Pseudoephedrine
Hydrochloride and Dextromethorphan Hydrobromide
in Redentai Oral Solution
Li Yongqing,Tian Zixin,Zhao Wen and Zhu Jihong
(National Institute for the Control of Pharmaceutical and Biological Products,Beijing 100050)
Abstract Objective：To establish an external standard HPLC method for the determination of guaifenesin,pseudoephedrine hydrochloride and dextromethorphan hydrochloride in Redentai oral solution.Method: The chromatographic conditions were as follows: Spherisorb C8 column(5 μm, 4.6 mm×250 mm),0.002 5 mol.L-1 1-hexane sulfonic acid methanolic solution-water (0.2% triethylamine)-0.3 mol.L-1 phosphoric acid(1.4∶1∶0.063)as the mobile phase and UV detector at 257 nm. Results: The calibration curves were linear in the range of 2.0～10.0 μg for guaifenesin(r=0.998 6)，0.3～1.5 μg for pseudoephedrine hydrochloride(r=0.999 9) and 0.15～0.65 μg for dextromethorphan hydrochloride(r=0.999 9)respectively. The average recoveries(n=5)were 100.8% for guaifenesin(RSD=0.9%)，100.5% for pseudoephedrine hydrochloride(RSD=1.0%) and 99.7% for dextromethorphan hydrobromide (RSD=1.2%). Conclusion:The method is rapid, accurate and reliable for the quality control of redentai oral solution.
, 百拇医药
Key words HPLC, guaifenesin, pseudoephedrine hydrochloride, dextromethorphan hydrobromide
雷登泰口服液为治疗感冒、咽炎等上呼吸道疾病的新药，是由愈创木酚甘油醚、盐酸伪麻黄碱、氢溴酸右美沙芬组成的复方制剂。文献报道，3种药物单一成分的检测采用高效液相色谱法[1，2]、薄层扫描法[3]、电极法[4]等，但此3种药物组成复方制剂的检测方法尚未见报道。本文采用了HPLC法对制剂中3种成分同时进行测定，分离完全，测定结果准确可靠。
1 仪器与试药
Waters 510泵，486检测器。
愈创木酚甘油醚、盐酸伪麻黄碱、氢溴酸右美沙芬化学对照品(中国药品生物制品检定所提供)；雷登泰口服液(西南药业有限公司提供)；其它均为分析纯。
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2 色谱条件
色谱柱：Spherisorb C8 5 μm 4.6 mm×250 mm；流动相：0.002 5 mol。L-1己烷磺酸甲醇溶液-水(含2%三乙胺)-3 mol。L-1磷酸(1.4∶1∶0.068)；流速：1 mL。min-1；进样量：10 μL；理论塔板数：以伪麻黄碱峰计应大于2 000，各峰分离度应大于2。
3 样品分析
3.1 线性范围测定 分别精密称取经干燥至恒重的盐酸伪麻黄碱、愈创木酚甘油醚、氢溴酸右美沙芬3种化学对照品，用50%甲醇溶液配制成浓度顺次为：0.6，4.0，2.6 mg。mL-1的混合标准溶液，精密量取此标准液1，2，3，4，5 mL于10 mL量瓶中，加50%甲醇溶液定容到刻度，摇匀，照样品测定法测定，结果见表1。
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表1 口服液中各成分线性范围测定结果 组分
回归方程
r
浓度范围/
mg。mL-1
盐酸伪麻黄碱
C=5.96×10-6A-0.0570
0.9999
0.06～0.30
愈创木酚甘油醚
C=1.77×10-8A-4.24
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0.9986
0.40～2.00
氢溴酸右美沙芬
C=4.81×10-8A-0.0578
0.9999
0.026～0.15
注：C为浓度 A为面积
3.2 回收率测定 按雷登泰口服液处方称取各成分及各种辅料，配制成供试液，照样品测定法测定，测得结果：盐酸伪麻黄碱回收率平均值为100.5%(n=5)，RSD为1.0%；愈创木酚甘油醚回收率平均值为100.8%(n=5)，RSD为0.9%；氢溴酸右美沙芬回收率平均值为99.69%(n=5),RSD为1.2%。
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3.3 重现性测定 取本品1批，照样品测定法测定5份，测定各成分含量，测得结果：含盐酸伪麻黄碱为标示量的99.57%(n=5)，RSD为1.0%；含愈创木酚甘油醚为标示量的100.9%(n=5)，RSD为0.9%；含氢溴酸右美沙芬为标示量的100.0%(n=5)，RSD为1.2%。
3.4 样品测定 准确量取雷登泰口服液2.0 mL置于100 mL分液漏斗中，加氯化钠0.9 g，振摇，使充分溶解，加氨试液4滴，摇匀，用氯仿(经氢氧化钠试液洗涤并重蒸)-甲醇混合溶剂(12∶1)提取3次，用量依次为15，15，10 mL，合并有机层，用饱和氯化钠溶液5 mL洗1次，水层用混合溶剂10 mL回提1次，合并有机层，通过无水硫酸钠滤过，滤液在50 ℃减压蒸干，精密加50%甲醇液5 mL，溶解，摇匀即得样品溶液。另精密称取经105 ℃干燥至恒重的盐酸伪麻黄碱；60 ℃减压干燥至恒重的氢溴酸右美沙芬及真空干燥至恒重的愈创木酚甘油醚化学对照品适量，用50%甲醇溶液配制成浓度顺次为1.50，0.75，5.00 mg。mL-1的混合对照品溶液。分别精密吸取上述2种溶液各5 μL，注入液相色谱仪，记录峰面积，计算，即得。3批样品测定结果见表2(色谱图见图1)。
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表2 口服液样品测定结果(%) 批号
盐酸伪麻黄碱
愈创木酚甘油醚
氢溴酸右美沙芬
941101
99.0
97.6
98.4
941002
98.6
98.4
99.0
, 百拇医药
941003
100.4
101.3
101.9
图1 混合对照品溶液(A)与样品溶液(B)色谱图
1.盐酸伪麻黄碱(3.52 min)2.愈创木酚甘油醚(4.90 min)
3.氢溴酸右美沙芬(7.48 min)
4 讨论
由于愈创木酚甘油醚在水中有一定的溶解度，因此在提取过程中本文采取盐析的方法，避免愈创木酚甘油醚的损失。在方法研制中我们发现，用未经处理的氯仿提取盐酸伪麻黄碱有分解现象，可能是氯仿中含有微量光气的结果，改用经氢氧化钠试液洗涤并重蒸的氯仿提取，避免了盐酸伪麻黄碱在提取过程中分解。采用氯仿-甲醇混合溶剂提取，一方面可以缓解乳化，另一方面可增加右美沙芬的提取率。
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经阴性实验，结果证明本品辅料对3种成分含量测定结果无干扰。
参考文献
1，安国升，李玉珍.HPLC法测定愈创木酚甘油醚的血药浓度.中国药学杂志，1995，30(6)：317
2，高素英，陈镇生，郑国源.HPLC法测定盐酸伪麻黄碱扑尔敏胶囊含量.现代医用药学，1995，12(3)：37
3，文洁，彭维，陆学筠等.薄层扫描法测定国产麻黄中麻黄碱的含量.中药材，1995，13(5)：248
4，屈爱桃，孙利明，屈志军.麻黄碱电极法测定止咳糖浆中的盐酸麻黄碱含量.药物分析杂志，1993，13(4)：248
(本文于1998年12月29日收到), http://www.100md.com
单位：李永庆 田子新 赵文 朱霁虹(中国药品生物制品检定所 北京 100050)
关键词：高效液相色谱法；愈创木酚甘油醚；盐酸伪麻黄碱；氢溴酸右美沙芬
药物分析杂志000208 摘要 目的：采用高效液相色谱外标法测定雷登泰口服液中愈创木酚甘油醚、盐酸伪麻黄碱、氢溴酸右美沙芬的含量。方法：色谱柱为Spherisorb C8 5 μm 4.6 mm×250 mm，流动相为0.002 5 mol.L-1己烷磺酸甲醇溶液-水(含2%三乙胺)-3 mol.L-1磷酸(1.4∶1∶0.063)，紫外检测器，检测波长257 nm。结果：愈创木酚甘油醚进样量在2.0～10.0 μg，盐酸伪麻黄碱在0.3～1.5 μg，氢溴酸右美沙芬在0.15～0.65 μg范围内与峰面积呈良好的线性关系，相关系数依次为0.998 6，0.999 9，0.999 9，回收率依次为100.8%，100.5%，99.69%。结论：本法精密度好，结果准确可靠。
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HPLC Determination of Guaifenesin,Pseudoephedrine
Hydrochloride and Dextromethorphan Hydrobromide
in Redentai Oral Solution
Li Yongqing,Tian Zixin,Zhao Wen and Zhu Jihong
(National Institute for the Control of Pharmaceutical and Biological Products,Beijing 100050)
Abstract Objective：To establish an external standard HPLC method for the determination of guaifenesin,pseudoephedrine hydrochloride and dextromethorphan hydrochloride in Redentai oral solution.Method: The chromatographic conditions were as follows: Spherisorb C8 column(5 μm, 4.6 mm×250 mm),0.002 5 mol.L-1 1-hexane sulfonic acid methanolic solution-water (0.2% triethylamine)-0.3 mol.L-1 phosphoric acid(1.4∶1∶0.063)as the mobile phase and UV detector at 257 nm. Results: The calibration curves were linear in the range of 2.0～10.0 μg for guaifenesin(r=0.998 6)，0.3～1.5 μg for pseudoephedrine hydrochloride(r=0.999 9) and 0.15～0.65 μg for dextromethorphan hydrochloride(r=0.999 9)respectively. The average recoveries(n=5)were 100.8% for guaifenesin(RSD=0.9%)，100.5% for pseudoephedrine hydrochloride(RSD=1.0%) and 99.7% for dextromethorphan hydrobromide (RSD=1.2%). Conclusion:The method is rapid, accurate and reliable for the quality control of redentai oral solution.
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Key words HPLC, guaifenesin, pseudoephedrine hydrochloride, dextromethorphan hydrobromide
雷登泰口服液为治疗感冒、咽炎等上呼吸道疾病的新药，是由愈创木酚甘油醚、盐酸伪麻黄碱、氢溴酸右美沙芬组成的复方制剂。文献报道，3种药物单一成分的检测采用高效液相色谱法[1，2]、薄层扫描法[3]、电极法[4]等，但此3种药物组成复方制剂的检测方法尚未见报道。本文采用了HPLC法对制剂中3种成分同时进行测定，分离完全，测定结果准确可靠。
1 仪器与试药
Waters 510泵，486检测器。
愈创木酚甘油醚、盐酸伪麻黄碱、氢溴酸右美沙芬化学对照品(中国药品生物制品检定所提供)；雷登泰口服液(西南药业有限公司提供)；其它均为分析纯。
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2 色谱条件
色谱柱：Spherisorb C8 5 μm 4.6 mm×250 mm；流动相：0.002 5 mol。L-1己烷磺酸甲醇溶液-水(含2%三乙胺)-3 mol。L-1磷酸(1.4∶1∶0.068)；流速：1 mL。min-1；进样量：10 μL；理论塔板数：以伪麻黄碱峰计应大于2 000，各峰分离度应大于2。
3 样品分析
3.1 线性范围测定 分别精密称取经干燥至恒重的盐酸伪麻黄碱、愈创木酚甘油醚、氢溴酸右美沙芬3种化学对照品，用50%甲醇溶液配制成浓度顺次为：0.6，4.0，2.6 mg。mL-1的混合标准溶液，精密量取此标准液1，2，3，4，5 mL于10 mL量瓶中，加50%甲醇溶液定容到刻度，摇匀，照样品测定法测定，结果见表1。
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表1 口服液中各成分线性范围测定结果 组分
回归方程
r
浓度范围/
mg。mL-1
盐酸伪麻黄碱
C=5.96×10-6A-0.0570
0.9999
0.06～0.30
愈创木酚甘油醚
C=1.77×10-8A-4.24
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0.9986
0.40～2.00
氢溴酸右美沙芬
C=4.81×10-8A-0.0578
0.9999
0.026～0.15
注：C为浓度 A为面积
3.2 回收率测定 按雷登泰口服液处方称取各成分及各种辅料，配制成供试液，照样品测定法测定，测得结果：盐酸伪麻黄碱回收率平均值为100.5%(n=5)，RSD为1.0%；愈创木酚甘油醚回收率平均值为100.8%(n=5)，RSD为0.9%；氢溴酸右美沙芬回收率平均值为99.69%(n=5),RSD为1.2%。
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3.3 重现性测定 取本品1批，照样品测定法测定5份，测定各成分含量，测得结果：含盐酸伪麻黄碱为标示量的99.57%(n=5)，RSD为1.0%；含愈创木酚甘油醚为标示量的100.9%(n=5)，RSD为0.9%；含氢溴酸右美沙芬为标示量的100.0%(n=5)，RSD为1.2%。
3.4 样品测定 准确量取雷登泰口服液2.0 mL置于100 mL分液漏斗中，加氯化钠0.9 g，振摇，使充分溶解，加氨试液4滴，摇匀，用氯仿(经氢氧化钠试液洗涤并重蒸)-甲醇混合溶剂(12∶1)提取3次，用量依次为15，15，10 mL，合并有机层，用饱和氯化钠溶液5 mL洗1次，水层用混合溶剂10 mL回提1次，合并有机层，通过无水硫酸钠滤过，滤液在50 ℃减压蒸干，精密加50%甲醇液5 mL，溶解，摇匀即得样品溶液。另精密称取经105 ℃干燥至恒重的盐酸伪麻黄碱；60 ℃减压干燥至恒重的氢溴酸右美沙芬及真空干燥至恒重的愈创木酚甘油醚化学对照品适量，用50%甲醇溶液配制成浓度顺次为1.50，0.75，5.00 mg。mL-1的混合对照品溶液。分别精密吸取上述2种溶液各5 μL，注入液相色谱仪，记录峰面积，计算，即得。3批样品测定结果见表2(色谱图见图1)。
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表2 口服液样品测定结果(%) 批号
盐酸伪麻黄碱
愈创木酚甘油醚
氢溴酸右美沙芬
941101
99.0
97.6
98.4
941002
98.6
98.4
99.0
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941003
100.4
101.3
101.9
图1 混合对照品溶液(A)与样品溶液(B)色谱图
1.盐酸伪麻黄碱(3.52 min)2.愈创木酚甘油醚(4.90 min)
3.氢溴酸右美沙芬(7.48 min)
4 讨论
由于愈创木酚甘油醚在水中有一定的溶解度，因此在提取过程中本文采取盐析的方法，避免愈创木酚甘油醚的损失。在方法研制中我们发现，用未经处理的氯仿提取盐酸伪麻黄碱有分解现象，可能是氯仿中含有微量光气的结果，改用经氢氧化钠试液洗涤并重蒸的氯仿提取，避免了盐酸伪麻黄碱在提取过程中分解。采用氯仿-甲醇混合溶剂提取，一方面可以缓解乳化，另一方面可增加右美沙芬的提取率。
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经阴性实验，结果证明本品辅料对3种成分含量测定结果无干扰。
参考文献
1，安国升，李玉珍.HPLC法测定愈创木酚甘油醚的血药浓度.中国药学杂志，1995，30(6)：317
2，高素英，陈镇生，郑国源.HPLC法测定盐酸伪麻黄碱扑尔敏胶囊含量.现代医用药学，1995，12(3)：37
3，文洁，彭维，陆学筠等.薄层扫描法测定国产麻黄中麻黄碱的含量.中药材，1995，13(5)：248
4，屈爱桃，孙利明，屈志军.麻黄碱电极法测定止咳糖浆中的盐酸麻黄碱含量.药物分析杂志，1993，13(4)：248
(本文于1998年12月29日收到), http://www.100md.com