维生素C对Trinder反应干扰的实验观察
作者:李玉玲 袁伟群
单位:李玉玲(鹤岗矿务局妇婴医院检验科);袁伟群(佳木斯纸业集团职工医院检验科)
关键词:Trinder反应;维生素C
黑龙江医药科学000213 近年来随着检验技术的飞速发展,酶反应在检验中大量应用,酶反应速度快、特异性强、无毒、无害是其优点,但有些酶学试验需要通过Trinder反应而完成比色。如血糖检验的GOD-POD法;胆固醇检验的CE-COP-POD法;甘油三脂检验的GK-GPO-POD法;尿酸检验的改良Trinder法等。这些实验在显色中均含有Trinder反应的特异性较差,易被一些还原性物质干扰,但以维生素C的干扰最为明显,干扰的原理是Vc与4-氨基安替比林竟争H2O2,从而使红色的醌亚胺生成减弱,颜色变浅而发生干扰。
1 实验材料
, http://www.100md.com
①3g/L的Vc溶液。②实验血清。③各种标准液。④各种酶试剂。⑤美国BECKMAN-700型,全自动生化分析仪。
2 实验方法与结果
将实验血清用与干扰实验相同的方法测定20次,确定各种特质的含量,然后加入不同的浓度的Vc进行干扰实验,观察Vc对各种物质的干扰情况,记录干扰后各物质的含量,计算干扰百分率。结果详见表1~4。
表1 Vc对血糖(GOD-POD法)的干扰
编号
1
2
3
4
, http://www.100md.com
5
6
7
8
9
10
11
Vc浓度(g/L)
0
0.03
0.09
0.14
0.20
, http://www.100md.com 0.25
0.30
0.40
0.50
0.60
0.70
实测值(mmol/L)
4.68
4.57
4.11
3.57
2.92
2.41
, http://www.100md.com
2.02
1.64
1.26
1.18
0
干扰(%)
0
2.35
12.18
23.61
37.61
48.51
56.84
, 百拇医药
64.96
73.08
96.75
100
表2 Vc对胆固醇(CE-COP-POD法)的干扰
编号
1
2
3
4
5
6
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, 百拇医药
8
9
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11
Vc浓度(g/L)
0
0.03
0.09
0.14
0.20
0.25
0.30
0.40
, 百拇医药
0.50
0.60
0.70
实测值(mmol/L)
4.67
4.34
3.95
3.48
3.10
2.62
2.17
1.85
1.26
, 百拇医药
0.32
0
干扰(%)
0
2.91
11.63
22.15
30.64
41.38
51.45
58.61
72.26
92.83
, 百拇医药
100
表3 Vc对甘油三脂(GK-GPO-POD法)的干扰
编号
1
2
3
4
5
6
7
8
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10
, 百拇医药
11
Vc浓度(g/L)
0
0.03
0.09
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0.20
0.25
0.30
0.40
0.50
0.60
0.70
, http://www.100md.com
实测值(mmol/L)
1.92
1.79
1.52
1.16
0.92
0.64
0.40
0.19
0.10
0
0
干扰(%)
, 百拇医药
0
6.77
20.82
39.58
52.82
66.67
79.15
90.10
94.79
100
100
表4 Vc对UA(尿酶-氧化酶法)的干扰
编号
, http://www.100md.com
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
Vc浓度(g/L)
0
0.01
, http://www.100md.com
0.03
0.06
0.09
0.12
0.15
0.18
0.21
0.24
0.27
实测值(mmol/L)
360
351
301
, 百拇医药
231
172
126
73
27
6.5
0
0
干扰(%)
0
2.5
16.4
35.8
, 百拇医药 5.3
65.0
79.7
92.5
98.1
100
100
3 讨论
3.1 一般门诊患者空腹采血不存在干扰问题但住院患者,特别是危重病人的抢救化验(输液过程中或大量之后抽血)易受干扰,肾功能不良者(Vc排出困难)干扰更为明显。
3.2 在检测血糖(GOD-POD)如发现血糖明显降低或与临床症状不符时,应以HK法或OTB法复查,HK法不受Vc及一些还原性物质的干扰,GOD-POD法当Vc的浓度为0.25g/l时(约快速输液1.25g Vc),干扰率为48.1%,可见干扰较明显。
, http://www.100md.com
3.3 胆固醇检验的CE-COP-POD法受Vc的干扰也较大。当Vc的浓度为0.3g/L时,干扰率为51.45%;当Vc的浓度为0.8g/L时,干扰率为100%。如发现患者使用了大量的Vc且需要急析胆固醇可选用改良LRC法(即异丙醇提取、高铁冰醋酸显色法),此法不受Vc干扰。
3.4 在TG检验中如发现GK-GPO-POD法发生干扰可选用INT法(碘硝酸四唑比色法)此法不受Vc干扰。
3.5 尿酸检验的尿酶-氧化酶法受Vc干扰最大,当Vc的浓度为0.24g/l时,干扰率为100%,而Vc又可使磷钨法检测结果偏高。
参考文献
1.何立千.血糖测定方法进展.中华医学检验杂志,1982;5(1):49
2.李健斋.血浆(清)甘油三酯测定方法陈述.中华医学检验杂志,1987;10(3):119
3.李健斋.用酶试剂测定血清甘油三酯中华医学检验杂志,1987;10(5):262
4.蔡贵民.几种血清尿酸测定方法以的评价.中华医学检验杂志,1986;(2):71
(1999-11-12收稿), 百拇医药
单位:李玉玲(鹤岗矿务局妇婴医院检验科);袁伟群(佳木斯纸业集团职工医院检验科)
关键词:Trinder反应;维生素C
黑龙江医药科学000213 近年来随着检验技术的飞速发展,酶反应在检验中大量应用,酶反应速度快、特异性强、无毒、无害是其优点,但有些酶学试验需要通过Trinder反应而完成比色。如血糖检验的GOD-POD法;胆固醇检验的CE-COP-POD法;甘油三脂检验的GK-GPO-POD法;尿酸检验的改良Trinder法等。这些实验在显色中均含有Trinder反应的特异性较差,易被一些还原性物质干扰,但以维生素C的干扰最为明显,干扰的原理是Vc与4-氨基安替比林竟争H2O2,从而使红色的醌亚胺生成减弱,颜色变浅而发生干扰。
1 实验材料
, http://www.100md.com
①3g/L的Vc溶液。②实验血清。③各种标准液。④各种酶试剂。⑤美国BECKMAN-700型,全自动生化分析仪。
2 实验方法与结果
将实验血清用与干扰实验相同的方法测定20次,确定各种特质的含量,然后加入不同的浓度的Vc进行干扰实验,观察Vc对各种物质的干扰情况,记录干扰后各物质的含量,计算干扰百分率。结果详见表1~4。
表1 Vc对血糖(GOD-POD法)的干扰
编号
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, http://www.100md.com
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Vc浓度(g/L)
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0.03
0.09
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0.40
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0.70
实测值(mmol/L)
4.68
4.57
4.11
3.57
2.92
2.41
, http://www.100md.com
2.02
1.64
1.26
1.18
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干扰(%)
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2.35
12.18
23.61
37.61
48.51
56.84
, 百拇医药
64.96
73.08
96.75
100
表2 Vc对胆固醇(CE-COP-POD法)的干扰
编号
1
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, 百拇医药
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Vc浓度(g/L)
0
0.03
0.09
0.14
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, 百拇医药
0.50
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0.70
实测值(mmol/L)
4.67
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3.48
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2.17
1.85
1.26
, 百拇医药
0.32
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干扰(%)
0
2.91
11.63
22.15
30.64
41.38
51.45
58.61
72.26
92.83
, 百拇医药
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表3 Vc对甘油三脂(GK-GPO-POD法)的干扰
编号
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Vc浓度(g/L)
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实测值(mmol/L)
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表4 Vc对UA(尿酶-氧化酶法)的干扰
编号
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Vc浓度(g/L)
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, 百拇医药
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干扰(%)
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2.5
16.4
35.8
, 百拇医药 5.3
65.0
79.7
92.5
98.1
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100
3 讨论
3.1 一般门诊患者空腹采血不存在干扰问题但住院患者,特别是危重病人的抢救化验(输液过程中或大量之后抽血)易受干扰,肾功能不良者(Vc排出困难)干扰更为明显。
3.2 在检测血糖(GOD-POD)如发现血糖明显降低或与临床症状不符时,应以HK法或OTB法复查,HK法不受Vc及一些还原性物质的干扰,GOD-POD法当Vc的浓度为0.25g/l时(约快速输液1.25g Vc),干扰率为48.1%,可见干扰较明显。
, http://www.100md.com
3.3 胆固醇检验的CE-COP-POD法受Vc的干扰也较大。当Vc的浓度为0.3g/L时,干扰率为51.45%;当Vc的浓度为0.8g/L时,干扰率为100%。如发现患者使用了大量的Vc且需要急析胆固醇可选用改良LRC法(即异丙醇提取、高铁冰醋酸显色法),此法不受Vc干扰。
3.4 在TG检验中如发现GK-GPO-POD法发生干扰可选用INT法(碘硝酸四唑比色法)此法不受Vc干扰。
3.5 尿酸检验的尿酶-氧化酶法受Vc干扰最大,当Vc的浓度为0.24g/l时,干扰率为100%,而Vc又可使磷钨法检测结果偏高。
参考文献
1.何立千.血糖测定方法进展.中华医学检验杂志,1982;5(1):49
2.李健斋.血浆(清)甘油三酯测定方法陈述.中华医学检验杂志,1987;10(3):119
3.李健斋.用酶试剂测定血清甘油三酯中华医学检验杂志,1987;10(5):262
4.蔡贵民.几种血清尿酸测定方法以的评价.中华医学检验杂志,1986;(2):71
(1999-11-12收稿), 百拇医药