柳穿鱼黄酮成分的研究
作者：华会明 孙军 李铣
单位：华会明 孙军 李铣 沈阳药科大学天然药物研究室 (110015)
关键词：柳穿鱼；黄酮
柳穿鱼黄酮成分的研究摘 要 从柳穿鱼Linaria vulgaris Mill.全草的乙醇提取物中分离到7个黄酮类化合物，经理化性质及光谱分析，分别鉴定为柳穿鱼苷元(Ⅰ)，柳穿鱼苷(Ⅱ)，粗毛豚草素(Ⅲ)，刺槐素(Ⅳ)，乙酰蒙花苷(Ⅴ)，木犀草素(Ⅵ)和4′-甲氧基-5，7，3′-三羟基黄酮(Ⅶ)。其中Ⅲ，Ⅴ，Ⅵ和Ⅶ为首次从该属植物中得到。
柳穿鱼Linaria vulgaris Mill.系玄参科柳穿鱼属多年生草本植物，分布于我国东北，内蒙古等地[1]。药用全草，具有清热解毒，散瘀消肿等功效，用于止咳、利尿，治头痛、头晕、黄疸、痔疮、便秘、皮肤病、烫火伤等。药理试验及临床应用表明其具有很强的镇咳、平喘、祛痰、消炎作用。同属植物的化学成分已发现80余种，其中包括黄酮、萜、生物碱等[2～4]。
, 百拇医药
我们采用层析和重结晶方法从该植物全草的乙醇提取物中分到7种黄酮化合物，根据它们的理化性质和多种光谱数据分析，分别鉴定为柳穿鱼苷元(pectolinarigenin, Ⅰ)，柳穿鱼苷(pectolinarin, Ⅱ)，粗毛豚草素(hispidulin, Ⅲ)，刺槐素(acacetin, Ⅳ)，乙酰蒙花苷(acetyl linarin,Ⅴ),木犀草素(luteolin，Ⅵ)和4′-甲氧基-5，7，3′-三羟基黄酮(diosmetin,Ⅶ)。其中Ⅲ，Ⅴ，Ⅵ和Ⅶ为首次从该属植物中得到, Ⅲ和Ⅵ具有抗炎、镇咳、祛痰作用[5]。
1 仪器和材料
熔点用Yanaco MP-53 熔点测定仪(未校正)。红外光谱用 Shimadzu IR-27G 型红外光谱仪。紫外光谱仪 UV-260型紫外光谱仪。核磁共振谱用 Bruket-AC(E)-250和300型核磁共振仪， TMS 为内标。质谱用 ZAB-2F 型质谱仪测定。柱层析用硅胶(200～300 目)及薄层层析用硅胶均系青岛海洋化工厂出品。实验用柳穿鱼全草采自黑龙江省哈尔滨市郊及泰康县，原植物由沈阳药科大学苏世文教授鉴定。
, 百拇医药
2 提取和分离
柳穿鱼干燥全草12 kg 粉碎后用95%乙醇回流提取，提取液浓缩后调至醇浓度为70%，过滤，滤液回收溶剂得流浸膏，加适量水依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取。将各种萃取液回收溶剂得相应的4部分浸膏。氯仿部分得浸膏 76 g, 经硅胶柱层析，以CHCl3-CH3OH梯度洗脱，在CHCl3-CH3OH (99∶1)洗脱部分得化合物Ⅰ174 mg， (98∶2)洗脱部分得化合物Ⅳ15 mg, (85∶15)洗脱部分得化合物 Ⅱ 72 mg, 再将 CHCl3-CH3OH (99∶2)洗脱部分的90～98份合并，经硅胶柱层析，CHCl3-Me2CO梯度洗脱及制备薄层层析得化合物Ⅲ 8 mg 与Ⅶ 5 mg。乙酸乙酯部分得浸膏 120 g, 经硅胶层柱层析，CHCl3-CH3OH 梯度洗脱，(99∶5) 洗脱得化合物 Ⅵ 11 mg，(9∶1)洗脱部分得化合物Ⅴ54 mg。
, 百拇医药
3 鉴定
化合物Ⅰ(柳穿鱼苷元)：淡黄色针晶(CHCl3-CH3OH), mp 223℃～224℃。Mg-HCl反应阳性。 HREIMS m/z: 314.0779 (M+，C17H14O6, 分子量 314.0790)，299(M-CH3)，296(M-H2O)，271(M-CH3-CO),167,133。UVλCH3OHmax nm:330.6,275.8,216.2。IR νKBrmax cm-1:3 326,2 942,1 660,1 603,1 509,1 475,1 432,1 358,1 272,1 184,1 077,1 018,871,831。1HNMR (DMSO-d6) δppm:3.74(3 H,s,C6-OCH3),3.84(3H,s,C4-OCH3),6.60(1 H,s,C8-H),6.85(1 H,s,C3-H),7.09，8.02(各2 H,d,J=8.7 Hz,C3，5-H 和 C2，6-H),10.75(1 H,br s,C7-OH),13.02(1 H,s,C5-OH)。13CNMR (DMSO-d6) δppm:55.2(C4′-OCH3),59.6(C6-OCH3),94.0(C8),102.7(C3),103.8(C10),114.2(C3，5),122.5(C1′),128.0(C2′,6′),131.1(C6),152.1(C7),152.4(C5),157.0(C9),162.0(C4′),163.0(C2),181.8(C4)。 Coloc 谱显示 δ 3.74 ppm (3 H,s,OCH3) 的氢与δ162.0 ppm (C4′) 的碳有远程相关表明2个OCH3 分别在 C6，C4′。综上数据，鉴定Ⅰ为 6，4′，-二甲氧基-5，7-二羟基黄酮，与文献[6]报道的柳穿鱼苷元一致。
, 百拇医药
化合物Ⅱ(柳穿鱼苷)：淡黄色粉末 (CH3OH)，mp 280℃～282℃, 分子式 C29H34O15，Mg-HCl 反应和 Molish 反应阳性。MS, IR, 1H,13CNMR 数据与文献[5，7，8]报道的柳穿鱼苷基本一致。酸水解薄层显示苷元与Ⅰ一致，且检出葡萄糖和鼠李糖，故鉴定Ⅱ为柳穿鱼苷。
化合物Ⅲ(粗毛豚草素)：淡黄色粉末(Me2CO), mp 275℃～276℃。MS,UV, 1H, 13CNMR 数据与文献[5，6]粗毛豚草素一致，故鉴定Ⅲ为粗毛豚草素。
化合物Ⅳ(刺槐素)：黄色结晶(Me2CO), mp 285℃～286℃, Mg-HCl反应阳性。分子式 C16H12O5。MS、UV, 1H, 13CNMR 数据与文献[5，9]报道的刺槐素一致，故鉴定Ⅳ为刺槐素。
, 百拇医药
化合物Ⅴ(乙酸蒙花苷)：淡黄色柱晶(CH3OH)， mp 212℃～214℃, 分子式 C30H34O15。 LSIMS m/z : 635(苷元-CH3CO)，152，132。IR νKBrmaxcm-1:3 396,2 937,1 718,1 658,1 602,1 500,1 436,1 349,1 251,1 182,1 057,906,842。1HNMR (DMSO-d6) δ ppm:1.08(3 H,d,J=6.0 Hz,rha-CH3),1.83(3 H,s,CH3CO),3.85(3 H,s,OCH3),4.56(1 H,brs,C1-H),4.69(1 H,dd,J=3.1,6.6 Hz),4.93(1 H,d,J=5.5 Hz),5.01(1 H,d,J=6.1 Hz),5.11(1 H,d,J=7.0 Hz,C1″-H),5.19(1 H,d,J=4.5 Hz),5.22(1 H,d,J=5.4 Hz),5.44(1 H,d,J=4.6 Hz),6.41(1 H,d,J=1.8 Hz,C6-H),6.80(1 H,d,J=1.8 Hz,C8-H),6.95(1 H,s,C3-H),7.10,8.04(各2 H,d,J=8.8 Hz,C35和C26-H),12.90(s,C5-OH)。13CNMR (DMSO-d6) δ ppm:20.6(CH3CO),55.3(OCH3),94.2(C8),99.3(C6),103.4(C3),105.2(C10),114.3(C3′,5′),122.3(C1′),128.1(C2′,6′),156.8(C5),160.8(C9),162.1(C4′),165.2(C2),163.6(C7),169.5(CH3CO),181.7(C4),glc:99.4(C1″),72.7(C2″),75.9(C3″),69.3(C4″),25.4(C5″),65.6(C6″)。rha: 99.9(C1)，68.6(C2)，68.1 (C3)，74.0(C4)，67.4(C5)，17.4(C6)。综上数据，鉴定Ⅴ为4′-甲氧基-5，7-二羟基黄酮-7-O-(4-乙酰基)-α-L-鼠李糖(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷。
, 百拇医药
化合物Ⅵ(木犀草素)：黄色粉末(CH3OH)，mp>300℃, UV,1HNMR 数据与文献[11]报道的木犀草素一致，故鉴定Ⅵ为木犀草素。
化合物Ⅶ(4′-甲氧基-5，7，3′-三羟基黄酮)：黄色粉末(Me2CO)，mp 252℃～253℃，HREIMS m/z:300.0629(M+,C16H12O6,Calc.300.0634),257(M-CO-CH3),229(M-2×COCH3)，153，148，133。UVλCH3OHmax nm:343.4，268.0，251.0；+CH3ONa：380.6，269.8，232.6；+NaOAc:366.8,274.8;+NaOAc/H3BO3:346.8,268.2,251.0。1HNMR(DMSO-d6)δppm:3.87(3 H,s,OCH3),6.21(1 H,d,J=18 Hz,C6-H),6.48(1 H,d,J=1.8 Hz,C8-H),6.74(1 H,s,C3-H),7.11(1 H,d,J=8.7 Hz,C5′-H),7.42(1 H,d,J=2.0 Hz,C2′-H),7.55(1 H,d,J=2.0,8.7 Hz,C6′-H),9.46(s,-OH),10.85(s,-OH),12.94(s,C5-OH)。13CNMR 数据与文献[12]报道的4′-甲氧基-5，7，3′-三羟基黄酮一致。
, 百拇医药
参 考 文 献
1 江苏新医学院编.中药大辞典.下册.上海：上海人民出版社，1977：1526
2 Smirnova L P, et al. Khim Prir Soedin, 1974, 10(1):96
3 Handjieva N V, et al. Tetrahedron, 1993,49(41):9261
4 Johne S, et al.Pharmazie, 1968, 23:35
5 国家医药管理局中草药情报中心站编.植物药有效成分手册.北京：人民卫生出版社，1986： 2，566，806
6 Becchi M, et al.Planta Med, 1980,38(3):267
, 百拇医药
7 Lin Chun-Nan，et al.Chem Pharm Bull, 1978,26(7):203
8 Otsuka H.J Nat Prod, 1992, 55(9): 1252
9 Wagner H, et al. Tetrahedron Lett, 1976, 21:1799
10 Ina H. Phytochemistry, 1981, 20(5),1176
11 李教社，等.药学学报，1996，31(11)：849
12 龚运淮编.天然有机化合物的13C核磁共振化学位移.昆明：云南科技术出版社，1986：164
(1998-04-08 收稿), 百拇医药
单位：华会明 孙军 李铣 沈阳药科大学天然药物研究室 (110015)
关键词：柳穿鱼；黄酮
柳穿鱼黄酮成分的研究摘 要 从柳穿鱼Linaria vulgaris Mill.全草的乙醇提取物中分离到7个黄酮类化合物，经理化性质及光谱分析，分别鉴定为柳穿鱼苷元(Ⅰ)，柳穿鱼苷(Ⅱ)，粗毛豚草素(Ⅲ)，刺槐素(Ⅳ)，乙酰蒙花苷(Ⅴ)，木犀草素(Ⅵ)和4′-甲氧基-5，7，3′-三羟基黄酮(Ⅶ)。其中Ⅲ，Ⅴ，Ⅵ和Ⅶ为首次从该属植物中得到。
柳穿鱼Linaria vulgaris Mill.系玄参科柳穿鱼属多年生草本植物，分布于我国东北，内蒙古等地[1]。药用全草，具有清热解毒，散瘀消肿等功效，用于止咳、利尿，治头痛、头晕、黄疸、痔疮、便秘、皮肤病、烫火伤等。药理试验及临床应用表明其具有很强的镇咳、平喘、祛痰、消炎作用。同属植物的化学成分已发现80余种，其中包括黄酮、萜、生物碱等[2～4]。
, 百拇医药
我们采用层析和重结晶方法从该植物全草的乙醇提取物中分到7种黄酮化合物，根据它们的理化性质和多种光谱数据分析，分别鉴定为柳穿鱼苷元(pectolinarigenin, Ⅰ)，柳穿鱼苷(pectolinarin, Ⅱ)，粗毛豚草素(hispidulin, Ⅲ)，刺槐素(acacetin, Ⅳ)，乙酰蒙花苷(acetyl linarin,Ⅴ),木犀草素(luteolin，Ⅵ)和4′-甲氧基-5，7，3′-三羟基黄酮(diosmetin,Ⅶ)。其中Ⅲ，Ⅴ，Ⅵ和Ⅶ为首次从该属植物中得到, Ⅲ和Ⅵ具有抗炎、镇咳、祛痰作用[5]。
1 仪器和材料
熔点用Yanaco MP-53 熔点测定仪(未校正)。红外光谱用 Shimadzu IR-27G 型红外光谱仪。紫外光谱仪 UV-260型紫外光谱仪。核磁共振谱用 Bruket-AC(E)-250和300型核磁共振仪， TMS 为内标。质谱用 ZAB-2F 型质谱仪测定。柱层析用硅胶(200～300 目)及薄层层析用硅胶均系青岛海洋化工厂出品。实验用柳穿鱼全草采自黑龙江省哈尔滨市郊及泰康县，原植物由沈阳药科大学苏世文教授鉴定。
, 百拇医药
2 提取和分离
柳穿鱼干燥全草12 kg 粉碎后用95%乙醇回流提取，提取液浓缩后调至醇浓度为70%，过滤，滤液回收溶剂得流浸膏，加适量水依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取。将各种萃取液回收溶剂得相应的4部分浸膏。氯仿部分得浸膏 76 g, 经硅胶柱层析，以CHCl3-CH3OH梯度洗脱，在CHCl3-CH3OH (99∶1)洗脱部分得化合物Ⅰ174 mg， (98∶2)洗脱部分得化合物Ⅳ15 mg, (85∶15)洗脱部分得化合物 Ⅱ 72 mg, 再将 CHCl3-CH3OH (99∶2)洗脱部分的90～98份合并，经硅胶柱层析，CHCl3-Me2CO梯度洗脱及制备薄层层析得化合物Ⅲ 8 mg 与Ⅶ 5 mg。乙酸乙酯部分得浸膏 120 g, 经硅胶层柱层析，CHCl3-CH3OH 梯度洗脱，(99∶5) 洗脱得化合物 Ⅵ 11 mg，(9∶1)洗脱部分得化合物Ⅴ54 mg。
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3 鉴定
化合物Ⅰ(柳穿鱼苷元)：淡黄色针晶(CHCl3-CH3OH), mp 223℃～224℃。Mg-HCl反应阳性。 HREIMS m/z: 314.0779 (M+，C17H14O6, 分子量 314.0790)，299(M-CH3)，296(M-H2O)，271(M-CH3-CO),167,133。UVλCH3OHmax nm:330.6,275.8,216.2。IR νKBrmax cm-1:3 326,2 942,1 660,1 603,1 509,1 475,1 432,1 358,1 272,1 184,1 077,1 018,871,831。1HNMR (DMSO-d6) δppm:3.74(3 H,s,C6-OCH3),3.84(3H,s,C4-OCH3),6.60(1 H,s,C8-H),6.85(1 H,s,C3-H),7.09，8.02(各2 H,d,J=8.7 Hz,C3，5-H 和 C2，6-H),10.75(1 H,br s,C7-OH),13.02(1 H,s,C5-OH)。13CNMR (DMSO-d6) δppm:55.2(C4′-OCH3),59.6(C6-OCH3),94.0(C8),102.7(C3),103.8(C10),114.2(C3，5),122.5(C1′),128.0(C2′,6′),131.1(C6),152.1(C7),152.4(C5),157.0(C9),162.0(C4′),163.0(C2),181.8(C4)。 Coloc 谱显示 δ 3.74 ppm (3 H,s,OCH3) 的氢与δ162.0 ppm (C4′) 的碳有远程相关表明2个OCH3 分别在 C6，C4′。综上数据，鉴定Ⅰ为 6，4′，-二甲氧基-5，7-二羟基黄酮，与文献[6]报道的柳穿鱼苷元一致。
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化合物Ⅱ(柳穿鱼苷)：淡黄色粉末 (CH3OH)，mp 280℃～282℃, 分子式 C29H34O15，Mg-HCl 反应和 Molish 反应阳性。MS, IR, 1H,13CNMR 数据与文献[5，7，8]报道的柳穿鱼苷基本一致。酸水解薄层显示苷元与Ⅰ一致，且检出葡萄糖和鼠李糖，故鉴定Ⅱ为柳穿鱼苷。
化合物Ⅲ(粗毛豚草素)：淡黄色粉末(Me2CO), mp 275℃～276℃。MS,UV, 1H, 13CNMR 数据与文献[5，6]粗毛豚草素一致，故鉴定Ⅲ为粗毛豚草素。
化合物Ⅳ(刺槐素)：黄色结晶(Me2CO), mp 285℃～286℃, Mg-HCl反应阳性。分子式 C16H12O5。MS、UV, 1H, 13CNMR 数据与文献[5，9]报道的刺槐素一致，故鉴定Ⅳ为刺槐素。
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化合物Ⅴ(乙酸蒙花苷)：淡黄色柱晶(CH3OH)， mp 212℃～214℃, 分子式 C30H34O15。 LSIMS m/z : 635(苷元-CH3CO)，152，132。IR νKBrmaxcm-1:3 396,2 937,1 718,1 658,1 602,1 500,1 436,1 349,1 251,1 182,1 057,906,842。1HNMR (DMSO-d6) δ ppm:1.08(3 H,d,J=6.0 Hz,rha-CH3),1.83(3 H,s,CH3CO),3.85(3 H,s,OCH3),4.56(1 H,brs,C1-H),4.69(1 H,dd,J=3.1,6.6 Hz),4.93(1 H,d,J=5.5 Hz),5.01(1 H,d,J=6.1 Hz),5.11(1 H,d,J=7.0 Hz,C1″-H),5.19(1 H,d,J=4.5 Hz),5.22(1 H,d,J=5.4 Hz),5.44(1 H,d,J=4.6 Hz),6.41(1 H,d,J=1.8 Hz,C6-H),6.80(1 H,d,J=1.8 Hz,C8-H),6.95(1 H,s,C3-H),7.10,8.04(各2 H,d,J=8.8 Hz,C35和C26-H),12.90(s,C5-OH)。13CNMR (DMSO-d6) δ ppm:20.6(CH3CO),55.3(OCH3),94.2(C8),99.3(C6),103.4(C3),105.2(C10),114.3(C3′,5′),122.3(C1′),128.1(C2′,6′),156.8(C5),160.8(C9),162.1(C4′),165.2(C2),163.6(C7),169.5(CH3CO),181.7(C4),glc:99.4(C1″),72.7(C2″),75.9(C3″),69.3(C4″),25.4(C5″),65.6(C6″)。rha: 99.9(C1)，68.6(C2)，68.1 (C3)，74.0(C4)，67.4(C5)，17.4(C6)。综上数据，鉴定Ⅴ为4′-甲氧基-5，7-二羟基黄酮-7-O-(4-乙酰基)-α-L-鼠李糖(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷。
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化合物Ⅵ(木犀草素)：黄色粉末(CH3OH)，mp>300℃, UV,1HNMR 数据与文献[11]报道的木犀草素一致，故鉴定Ⅵ为木犀草素。
化合物Ⅶ(4′-甲氧基-5，7，3′-三羟基黄酮)：黄色粉末(Me2CO)，mp 252℃～253℃，HREIMS m/z:300.0629(M+,C16H12O6,Calc.300.0634),257(M-CO-CH3),229(M-2×COCH3)，153，148，133。UVλCH3OHmax nm:343.4，268.0，251.0；+CH3ONa：380.6，269.8，232.6；+NaOAc:366.8,274.8;+NaOAc/H3BO3:346.8,268.2,251.0。1HNMR(DMSO-d6)δppm:3.87(3 H,s,OCH3),6.21(1 H,d,J=18 Hz,C6-H),6.48(1 H,d,J=1.8 Hz,C8-H),6.74(1 H,s,C3-H),7.11(1 H,d,J=8.7 Hz,C5′-H),7.42(1 H,d,J=2.0 Hz,C2′-H),7.55(1 H,d,J=2.0,8.7 Hz,C6′-H),9.46(s,-OH),10.85(s,-OH),12.94(s,C5-OH)。13CNMR 数据与文献[12]报道的4′-甲氧基-5，7，3′-三羟基黄酮一致。
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参 考 文 献
1 江苏新医学院编.中药大辞典.下册.上海：上海人民出版社，1977：1526
2 Smirnova L P, et al. Khim Prir Soedin, 1974, 10(1):96
3 Handjieva N V, et al. Tetrahedron, 1993,49(41):9261
4 Johne S, et al.Pharmazie, 1968, 23:35
5 国家医药管理局中草药情报中心站编.植物药有效成分手册.北京：人民卫生出版社，1986： 2，566，806
6 Becchi M, et al.Planta Med, 1980,38(3):267
, 百拇医药
7 Lin Chun-Nan，et al.Chem Pharm Bull, 1978,26(7):203
8 Otsuka H.J Nat Prod, 1992, 55(9): 1252
9 Wagner H, et al. Tetrahedron Lett, 1976, 21:1799
10 Ina H. Phytochemistry, 1981, 20(5),1176
11 李教社，等.药学学报，1996，31(11)：849
12 龚运淮编.天然有机化合物的13C核磁共振化学位移.昆明：云南科技术出版社，1986：164
(1998-04-08 收稿), 百拇医药