复方克林霉素凝胶的研制及疗效观察
作者：孙炬华 屈桂秋 刘薏 张金平
单位：首都医科大学附属北京红十字朝阳医院(100020)
关键词：克林霉素；替硝唑；凝胶临床疗效观察
首都医药990442摘要 目的：研究一种治疗寻常痤疮的外用制剂处方、设计制备工艺、建立制剂的含量测定方法、并对制剂进行临床疗效观察。方法：处方中选用盐酸克林霉素和替硝唑为主药，新型药用辅料卡波姆为基质，用HPLC法测定含量，结果可靠。结果：通过临床验证认为疗效确切，无刺激性，处方配伍合理，质量可控。结论：该制剂配制、含量测定方法可靠，临床疗效较好，值得推广应用。
痤疮是发生于青年男女中的一种常见皮肤病，多见于毛囊管腔的厌氧丙酸痤疮杆菌引起。目前，临床上用于治疗痤疮的外用制剂虽然有多种，但尚不理想，为此我们研究一种治疗寻常痤疮的外用制剂处方，选用了盐酸克林霉素和替硝唑为主药，卡波姆为辅料配制成凝胶，设计了制备工艺，应用HPLC法建立了制剂的含量测定方法。经临床观察认为，疗效可靠、制剂细腻、稠度适宜、易涂布、无刺激性，值得推广应用。
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1 仪器与药品
岛津LC-10AVP高效液相色谱仪，SPD-10AVP检测器，CR6A色谱数据处理机，盐酸克林霉素(CLM，华北制药集团有限责任公司)，替硝唑(TNZ，北京华靳制药有限公司)，卡波姆940(上海人民制药厂)，乙腈(色谱纯，天津四友生物医学技术有限公司)，磷酸二氢钾(北京市红星化工厂)。
2 处方及制备工艺
2.1 处方：盐酸克林霉素1g，替硝唑1g，月桂氮艹 卓酮0.5g，甘油8g，卡波姆9401g，10%三乙醇胺溶液10ml，蒸馏水加至100g。
2.2 制法：取卡波姆940加适量水搅拌使其溶胀成半透明状物，加入10%三乙醇胺溶液，搅匀成稠厚透明状，再加入甘油、月桂氮艹 卓酮搅拌均匀。将盐酸克林霉素、替硝唑分别溶于适量水中加入上述凝胶中，加蒸馏水至100g，搅拌均匀即得。
, 百拇医药
3 含量测定
3.1 色谱条件 色谱柱：ODS柱(4.6mm×150mm)；流动相：0.05mol*L-1磷酸二氢钾——乙腈(80∶20)；流速：1.0ml*min-1；柱温：室温；检测波长：210nm；进样量10μl。
3.2 标准曲线绘制
3.2.1 标准贮备液的制备：取替硝唑对照品和盐酸克林霉素对照品各约0.1g，精密称定，分别置100ml量瓶中，用蒸馏水溶解并稀释至刻度，备用。
3.2.2 精密量取替硝唑标准贮备液用甲醇稀释成每ml含2.5μg、5.0μg、10.0μg、20.0μg、40.0μg、80.0μg、100.0μg系列浓度，取10μl进样，以峰面积Y对浓度X进行线性回归，得回归方程为：Y＝4805.2+4923.6X，r＝0.9998。在2.5μg～100μg*ml-1范围内，替硝唑线性良好。
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3.2.3 精密量取盐酸克林霉素标准贮备液用甲醇稀释成每ml含25.0μg、50.0μg、100.0μg、200μg、400.0μg、800.0μg、1000.0μg系列浓度，取10μl进样，以峰面积Y对浓度X进行线性回归，得回归方程为：Y＝24320.6+1186.0X，r＝0.9986，在25μg～1000μg*ml-1范围内，盐酸克林霉素线性良好。
3.3 回收率试验：按处方量精密称取替硝唑、盐酸克林霉素各约20mg和空白凝胶基质适量，置50ml量瓶中，用流动相溶解稀释至刻度，做为样品溶液。制备3份。精密量取样品溶液1ml用流动相稀释至10ml，进样10μl，测定替硝唑峰面积。直接取样品溶液10μl进样，测定盐酸克林霉素的峰面积。将峰面积测定结果分别代入“标准曲线绘制”项下的方程中计算其含量。测定结果见表1。
表1 CLM与TNZ的回收率结果 n＝3 药物
, 百拇医药 投入量
μg*ml-1
实测量
μg*ml-1
回收率
%
RSD
%
CLM
360
363.0
100.8
0.33
, 百拇医药
400
412.8
103.2
0.48
350
355.5
101.6
0.26
TNZ
400
403.4
100.9
1.50
, http://www.100md.com
410
402.4
98.16
1.61
390
397.8
102.0
1.62
3.4 重复性与稳定性：取模拟样品溶液照“回收率试验”项下的方法测定，每隔2h测定一次，连续测定3次。结果替硝唑的RSD＝0.46%，盐酸克林霉素的RSD＝0.14%。将该溶液放置24h和48h后再测定，所得测定结果与零时基本一致。结果表明重复性和稳定性较好。
4 临床应用
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4.1 病例选择：凡确诊为寻常痤疮的患者，年龄12岁～35岁，无伴随疾病，按PILLSBURV分类：病型Ⅰ度有8人，Ⅱ度12人，Ⅲ度9人。其中2人为首次治疗，其余患者在用本品前均使用过外用药或口服药治疗，但效果不佳。
4.2 治疗方法：清水洗面后用该药涂抹患处，每日2次连续用药4周。
4.3 排除病例：凡服用达英-35、维甲酸类药物者不入选。
4.4 判断标准〔1〕：治愈：皮损计数为0，或减少≥90%；显效：皮损计数减少≥70%；有效：皮损计数减少≥30%；无效：皮损计数减少<30%或增多。
4.5 结果：用复方克林霉素凝胶治疗寻常痤疮29例，治愈3例(10.3%)，显效18例(62.1%)，有效6例(20.7%)，无效2例(6.9%)，总有效率为93.1%。
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5 讨论
5.1 主药盐酸克林霉素对革兰氏阳性菌有良好的杀菌活性，对厌氧菌的作用尤强，特别是类杆菌、梭状杆菌较敏感。替硝唑为强效抗菌药，对大多数专性厌氧菌抗菌作用强，毒副作用比甲硝唑低，无致癌毒性。两者配伍作用增强，外用涂抹治疗寻常痤疮获得良好的效果。
5.2 卡波姆(carbomer)别名卡波普耳，是一种新型药用辅料，具有水溶性基质的特点，且搽于皮肤上有特别的细腻滑爽感，与皮肤藕合效果极佳〔2〕有利于药物在局部发挥作用。三乙醇胺作为卡波姆的中和剂，起着增稠和增粘作用，一般用量与卡波姆相等，此时pH值适中〔3〕。
5.3 用HPLC法测定复方克林霉素凝胶的含量，采用同一流动相，根据出峰时间不同，盐酸克林霉素和替硝唑的峰分离好，相互没有影响。处方量的辅料对含量测定没有干扰。该测定方法专属性强，结果准确。 (审稿：屈桂秋教授)
参考文献
1 周展超，郑家润，徐文严.外用25%丹参酮霜治疗寻常痤疮的临床实验研究.临床皮肤科杂志，1996，6：376
2 罗明生，高天惠主编.药剂辅料大全.成都：四川科学技术出版社，1993：383
3 张晓乐，赵蕊，钱娓.卡波姆基质口腔溃疡乳化型凝胶的研制.中国药学杂志，1995，30(7)：417, http://www.100md.com
单位：首都医科大学附属北京红十字朝阳医院(100020)
关键词：克林霉素；替硝唑；凝胶临床疗效观察
首都医药990442摘要 目的：研究一种治疗寻常痤疮的外用制剂处方、设计制备工艺、建立制剂的含量测定方法、并对制剂进行临床疗效观察。方法：处方中选用盐酸克林霉素和替硝唑为主药，新型药用辅料卡波姆为基质，用HPLC法测定含量，结果可靠。结果：通过临床验证认为疗效确切，无刺激性，处方配伍合理，质量可控。结论：该制剂配制、含量测定方法可靠，临床疗效较好，值得推广应用。
痤疮是发生于青年男女中的一种常见皮肤病，多见于毛囊管腔的厌氧丙酸痤疮杆菌引起。目前，临床上用于治疗痤疮的外用制剂虽然有多种，但尚不理想，为此我们研究一种治疗寻常痤疮的外用制剂处方，选用了盐酸克林霉素和替硝唑为主药，卡波姆为辅料配制成凝胶，设计了制备工艺，应用HPLC法建立了制剂的含量测定方法。经临床观察认为，疗效可靠、制剂细腻、稠度适宜、易涂布、无刺激性，值得推广应用。
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1 仪器与药品
岛津LC-10AVP高效液相色谱仪，SPD-10AVP检测器，CR6A色谱数据处理机，盐酸克林霉素(CLM，华北制药集团有限责任公司)，替硝唑(TNZ，北京华靳制药有限公司)，卡波姆940(上海人民制药厂)，乙腈(色谱纯，天津四友生物医学技术有限公司)，磷酸二氢钾(北京市红星化工厂)。
2 处方及制备工艺
2.1 处方：盐酸克林霉素1g，替硝唑1g，月桂氮艹 卓酮0.5g，甘油8g，卡波姆9401g，10%三乙醇胺溶液10ml，蒸馏水加至100g。
2.2 制法：取卡波姆940加适量水搅拌使其溶胀成半透明状物，加入10%三乙醇胺溶液，搅匀成稠厚透明状，再加入甘油、月桂氮艹 卓酮搅拌均匀。将盐酸克林霉素、替硝唑分别溶于适量水中加入上述凝胶中，加蒸馏水至100g，搅拌均匀即得。
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3 含量测定
3.1 色谱条件 色谱柱：ODS柱(4.6mm×150mm)；流动相：0.05mol*L-1磷酸二氢钾——乙腈(80∶20)；流速：1.0ml*min-1；柱温：室温；检测波长：210nm；进样量10μl。
3.2 标准曲线绘制
3.2.1 标准贮备液的制备：取替硝唑对照品和盐酸克林霉素对照品各约0.1g，精密称定，分别置100ml量瓶中，用蒸馏水溶解并稀释至刻度，备用。
3.2.2 精密量取替硝唑标准贮备液用甲醇稀释成每ml含2.5μg、5.0μg、10.0μg、20.0μg、40.0μg、80.0μg、100.0μg系列浓度，取10μl进样，以峰面积Y对浓度X进行线性回归，得回归方程为：Y＝4805.2+4923.6X，r＝0.9998。在2.5μg～100μg*ml-1范围内，替硝唑线性良好。
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3.2.3 精密量取盐酸克林霉素标准贮备液用甲醇稀释成每ml含25.0μg、50.0μg、100.0μg、200μg、400.0μg、800.0μg、1000.0μg系列浓度，取10μl进样，以峰面积Y对浓度X进行线性回归，得回归方程为：Y＝24320.6+1186.0X，r＝0.9986，在25μg～1000μg*ml-1范围内，盐酸克林霉素线性良好。
3.3 回收率试验：按处方量精密称取替硝唑、盐酸克林霉素各约20mg和空白凝胶基质适量，置50ml量瓶中，用流动相溶解稀释至刻度，做为样品溶液。制备3份。精密量取样品溶液1ml用流动相稀释至10ml，进样10μl，测定替硝唑峰面积。直接取样品溶液10μl进样，测定盐酸克林霉素的峰面积。将峰面积测定结果分别代入“标准曲线绘制”项下的方程中计算其含量。测定结果见表1。
表1 CLM与TNZ的回收率结果 n＝3 药物
, 百拇医药 投入量
μg*ml-1
实测量
μg*ml-1
回收率
%
RSD
%
CLM
360
363.0
100.8
0.33
, 百拇医药
400
412.8
103.2
0.48
350
355.5
101.6
0.26
TNZ
400
403.4
100.9
1.50
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410
402.4
98.16
1.61
390
397.8
102.0
1.62
3.4 重复性与稳定性：取模拟样品溶液照“回收率试验”项下的方法测定，每隔2h测定一次，连续测定3次。结果替硝唑的RSD＝0.46%，盐酸克林霉素的RSD＝0.14%。将该溶液放置24h和48h后再测定，所得测定结果与零时基本一致。结果表明重复性和稳定性较好。
4 临床应用
, http://www.100md.com
4.1 病例选择：凡确诊为寻常痤疮的患者，年龄12岁～35岁，无伴随疾病，按PILLSBURV分类：病型Ⅰ度有8人，Ⅱ度12人，Ⅲ度9人。其中2人为首次治疗，其余患者在用本品前均使用过外用药或口服药治疗，但效果不佳。
4.2 治疗方法：清水洗面后用该药涂抹患处，每日2次连续用药4周。
4.3 排除病例：凡服用达英-35、维甲酸类药物者不入选。
4.4 判断标准〔1〕：治愈：皮损计数为0，或减少≥90%；显效：皮损计数减少≥70%；有效：皮损计数减少≥30%；无效：皮损计数减少<30%或增多。
4.5 结果：用复方克林霉素凝胶治疗寻常痤疮29例，治愈3例(10.3%)，显效18例(62.1%)，有效6例(20.7%)，无效2例(6.9%)，总有效率为93.1%。
, http://www.100md.com
5 讨论
5.1 主药盐酸克林霉素对革兰氏阳性菌有良好的杀菌活性，对厌氧菌的作用尤强，特别是类杆菌、梭状杆菌较敏感。替硝唑为强效抗菌药，对大多数专性厌氧菌抗菌作用强，毒副作用比甲硝唑低，无致癌毒性。两者配伍作用增强，外用涂抹治疗寻常痤疮获得良好的效果。
5.2 卡波姆(carbomer)别名卡波普耳，是一种新型药用辅料，具有水溶性基质的特点，且搽于皮肤上有特别的细腻滑爽感，与皮肤藕合效果极佳〔2〕有利于药物在局部发挥作用。三乙醇胺作为卡波姆的中和剂，起着增稠和增粘作用，一般用量与卡波姆相等，此时pH值适中〔3〕。
5.3 用HPLC法测定复方克林霉素凝胶的含量，采用同一流动相，根据出峰时间不同，盐酸克林霉素和替硝唑的峰分离好，相互没有影响。处方量的辅料对含量测定没有干扰。该测定方法专属性强，结果准确。 (审稿：屈桂秋教授)
参考文献
1 周展超，郑家润，徐文严.外用25%丹参酮霜治疗寻常痤疮的临床实验研究.临床皮肤科杂志，1996，6：376
2 罗明生，高天惠主编.药剂辅料大全.成都：四川科学技术出版社，1993：383
3 张晓乐，赵蕊，钱娓.卡波姆基质口腔溃疡乳化型凝胶的研制.中国药学杂志，1995，30(7)：417, http://www.100md.com