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编号:10209692
氦氖激光血管内照射配合舒冠合剂对家兔实验性心肌缺血的保护
http://www.100md.com 《实用医学进修杂志》 1999年第1期
     作者:陈 涛 叶 红 孙红艳 王 鹏 王春林 张占伟

    单位:陈 涛 叶 红 孙红艳:湖北三峡学院医学院中医系(宜昌 443003) 王 鹏 王春林 张占伟:中医系97级本科01班

    关键词:激光;血管内照射;中药;舒冠合剂;心肌缺血

    实用医学进修杂志990109

    摘 要 本实验以结扎家兔左心室冠状动脉前降支(LAD),造成急性心肌缺血模型,来观察氦氖激光血管内照射加舒冠合剂治疗冠心病的部分作用及作用机制。实验结果表明,该疗法能缩小家兔实验性心肌梗塞范围,降低AST、CK、LDH、α-HBDH酶释放量和EKG肢体Ⅱ导联ST段升幅,提高心肌SOD水平,降低心肌MDA含量。以上结果说明血疗加舒冠合剂在防治冠心病心肌梗塞方面有重要的应用价值

    The Protection of Intravascular Irradiation with Helium Neon
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    Laster And the Traditional Chinese Medicine Suguanheji

    For Rabbits’Experimental Myocardial Ischemia

    Chen Tao Ye Hong Sun Hongyan Wang Beng Wang Chunling Zhang Chuanwei

    HuBei Three Gorges University Medical College,Yichang 443003

    Abstract We observe the partial effect and its mechanism of intrascalar irradiation with helium neon laster and traditional chinese medicine Suganheji,by ligating rabbits’descending anterior branch(LAD)of left ventricle horror coronary artery to make ccute cardial musile ischemia.The results from the experiment induate that the treatment can reduce the scope of rabbits’experimental myocardial ischemia,reduce the enzyme recease capacity of AS、TCK、LDH、α-HBDH and the S-T segment elevatire range of EKG extremity 2,increase SOD level of cardial muscle,and reduce MDA content of cardicel muscle.It can be concluded that there is important value,of the application of hemotheraphy and traditional chinese medicine Suguanheji on preventing and acring the myocardial ischemia repect of coronary heart disease.
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    Key words laster;intravasuclar irradiation;traditional chinese medicine;suguanheji;myocardial ischemia.

    低能量氦氖激光血管内照射(简称:血疗)治疗冠心病,目前已在临床一定范围内应用,疗效逐步肯定。在此基础上,我们观察了血疗加舒冠合剂对家兔实验性心肌梗塞范围、心电图、心肌酶谱、心肌过氧化脂质和超氧化物岐化酶等的影响,来研究血疗、舒冠合剂联合应用治疗冠心病的增效作用及其机制,现将研究总结如下:

    1 材料与方法

    1.1 实验材料

    动物 家兔,雌雄兼有,1.7~3.0kg,平均2.3kg,由本院实验动物中心提供。

    器材 ZJC480型电脑多功能氦氖激光血管内照射治疗仪,长春中吉光电公司生产;XDH-3型心电图机,上海医用电子仪器厂生产;APECTRONIC501型半自动生化分析仪,美国生产;721分光光度计,上海第三分析仪器厂生产;MA200型电子分析天平,上海第二天平仪器厂生产。
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    药物与试剂 舒冠合剂,是宜昌市中医院内科经验方,由丹参、瓜蒌、郁金、枳实等中药组成,每毫升含生药1g,由市中医院制剂室提供;心肌酶标准品,由中国长征公司提供;3.3-四乙氧基烷(TEP)为Fluka公司产品;其余均为国产分析纯。N-BT染色液;用硝基四氮唑蓝溶于磷酸缓冲液(pH-7.4)中配制成0.5%的新鲜溶液。

    1.2 实验方法

    按参考文献[1]方法 取家兔24只,随机分为3组,即生理盐水组(对照Ⅰ组)、舒冠合剂组(对照Ⅱ组)、血疗 加舒冠合剂组(实验组)。

    麻醉前,将家兔固定于兔手术台上,以针形电极扎入四肢皮下,用XDH-3型心电图机测量标准肢体Ⅱ导联心电图(EKG),20%乌拉坦溶液(5ml/kg)从兔耳缘静脉缓缓推入麻醉,麻醉后再测一次EKG,取正中切口,切开皮肤,沿胸骨正中向左,钝性分离肌肉,暴露3、4肋骨,贴胸骨左缘切断,以小型开胸器扩开切口使心脏暴露良好,以眼科镊轻提起心包,小心剪开,用止血钳提起左心耳,用3×8圆针,0000号丝线,于冠状动脉前降支(LAD)距冠脉出口下方3mm和5mm处双重结扎LAD,即刻心脏收缩减弱,闭塞冠脉所支配区域变为暗紫色,膨出,EKG示已造成心肌梗塞,然后缝合关闭胸腔,肌注80万单位青霉素预防感染。
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    结扎后立即进行治疗,实验组行低能量He-Ne激光耳缘静脉内照射40min(3.0mW,快频率),同时按3.3g/kg的剂量腹腔注射舒冠合剂,并于术后第2天、第3天、第4天相同时间重复治疗一次,对照Ⅱ组和对照Ⅰ组分别按3.3g/kg的剂量腹腔注射舒冠合剂或生理盐水,不作激光照射,同样亦于术后第2天、第3天、第4天相同时间重复治疗一次,各组均在结扎LAD后2h、24h、48h和72h记录Ⅱ导联EKG。

    结扎后72h,耳缘静脉采血,离心分离血清,冷藏待测,击头致晕,于胸骨正中剪开胸腔取出心脏,生理盐水冲洗净余血,沿冠状沟剪去心房及大血管,在电子天平上称心室重量。

    1.3 观测指标

    1.3.1 EKG 观测Ⅱ导联EKG的心率(HR)、ST段、T波等变化,并计算ST段抬高值。

    1.3.2 心肌梗塞范围 N-BT染色法,将心室肌切成4~5片,每片厚约0.5~0.8cm,置N-BT染色液中,在37℃恒温水浴中染色15min,正常心肌染为暗蓝色,梗塞区心肌不着色,用电子天平称取梗塞区心肌重量,然后计算出梗塞区占全心脏重量的百分率。
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    1.3.3 心肌酶谱 血清谷草转氨酶(AST),血清乳酸脱氢酶(LDH),血清α-羟丁酸脱氢酶(α-HBDH),血清肌酸激酶(CK),采用半自动生化分析仪测定。

    1.3.4 心肌丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD):用硫代巴比妥酸(TBA)比色法[2]测定心肌MDA,用光化学扩增法[3]测定心肌SOD,用Lowry氏法测定蛋白质含量[4]

    1.4 数据处理及统计方法

    方差分析、t检验。

    2 实验结果

    2.1 对心肌梗塞范围的影响

    实验组用血疗加舒冠合剂能明显减小家兔实验性心肌梗塞面积,与对照Ⅰ组和对照Ⅱ组比较均有显著差异(P<0.001)(见表1)。
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    2.2 对EKG的ST段影响

    血疗加舒冠合剂能明显降低家兔实验性心肌缺血EKG上ST段抬高值,在结扎LAD后的24h、48h、72h与药物组比较均有显著差异(见表2)。 表1 血疗加舒冠合剂对家兔实验性心肌梗塞范围的影响(±s)

    组 别

    动物数(只)

    心室总重量(g)

    梗塞重量(g)

    梗塞率(%)

    对照Ⅰ组

    对照Ⅱ组
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    实验组

    8

    8

    8

    4.66±0.68

    4.49±0.95

    4.48±1.07

    0.70±0.05

    0.39±0.15

    0.23±0.10

    15.15±1.73

    8.45±2.27**
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    5.08±1.61△△

    注:**与对照Ⅰ组比较,P<0.001;△△与对照Ⅱ组比较P<0.001

    表2 血疗加舒冠合剂对实验性心肌缺血ST段均值的影响(mv,±s) 组 别

    动物数(只)

    结扎术后2h

    24h

    48h

    72h

    对照Ⅰ组

    对照Ⅱ组
, 百拇医药
    实验组

    8

    8

    8

    0.356±0.056

    0.393±0.178

    0.326±0.111

    0.375±0.136

    0.393±0.198

    0.242±0.044△**

    0.2910.122

    0.303±0.170
, 百拇医药
    0.228±0.127△*

    0.369±0.094

    0.333±0.150

    0.202±0.105*△△

    注:与对照Ⅰ组比较,*P<0.05,**P<0.01;与对照Ⅱ组比较△P<0.05,△△P<0.01

    2.3 对心肌酶活性的影响

    血疗加舒冠合剂能降低AST、CK、LDH和α-HBDH在血清中的含量,与对照Ⅰ组和对照Ⅱ组比较,均有明显的差异(P<0.001)(见表4)。 表3 血疗加舒冠合剂对家兔血清心肌酶谱的影响(u/l,±s)
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    组 别

    AST

    CK

    LDH

    α-HBDH

    对照Ⅰ组

    对照Ⅱ组

    实验组

    57.38±14.51

    42.25±5.90**

    31.63±6.50△△

    3002±424

, http://www.100md.com     2215±463**

    1669±339△△

    425.8±46.3

    389.6±65.1*

    311±49.21△△

    396.8±93.5

    370.5±48.31**

    296.3±49.2△△

    注:与对照Ⅰ组比较,*P<0.01,**P<0.001;与对照Ⅱ组比较△△P<0.001

    表4 血疗加舒冠合剂对家兔心肌MDA和SOD的影响(±s) 组 别
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    动物数(只)

    MDA(nmol/mgpr)

    SOD(u/mgpr)

    非缺血区(a)

    缺血区(b)

    非缺血区(a)

    缺血区(b)

    对照Ⅰ组

    对照Ⅱ组

    实验组

    8

    8

, 百拇医药     8

    2.09±0.44

    1.59±0.13**

    0.99±0.61△△

    2.61±0.49

    1.92±0.15**

    1.36±0.10**△△

    3.85±0.62

    4.56±0.29*

    5.53±0.44**△△

    3.33±0.25

    4.02±0.32**
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    4.95±0.2**△△

    注:与对照Ⅰ组比较,*P<0.01,**P<0.001;与对照Ⅱ组比较△△P<0.0013 讨论

    本实验以结扎家兔左心室冠状动脉前降支,造成急性心肌梗塞模型,来观察氦氖激光血管内照射加舒冠合剂治疗冠心病的部分作用机理,实验模型制作较为成功,通过N-BT染色发现,结扎LAD后家兔心肌上有大面积的梗塞区,梗塞面积约占心室面积的12~18%,同时检测出血清AST、CK、LDH、α-HBDH等心肌酶有相当程度的升高,特别是作为心肌细胞受损最敏感的标志CK,在血清中含量达3000U/L左右,说明心肌梗塞程度严重,此外,在EKG上反映出,LAD结扎后,ST段,T波均明显抬高,部分家兔出现病理性心率减慢甚至心律不齐。实验结果表明,血疗加舒冠合剂有明显的抗心肌缺血的作用,实施该方案治疗的家兔心肌梗塞范围明显缩小,心肌酶释量减少,EKG肢体Ⅱ导联平均ST段升幅降低,且作用优于单纯舒冠合剂治疗组,这些都说明血疗加舒冠合剂在防治心肌梗塞方面有显著疗效。
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    心肌在缺血或缺血/再灌注时有大量自由基生成并造成心肌结构和功能的损伤[5],这是目前公认的心肌缺血/再灌注的主要机制之一。正常情况下,线粒体电子传递过程中可以生成少量的氧自由基(OFR),而细胞内有自由基清除剂SOD,后者可使机体不造成损伤,心肌缺血时,自由基产生增多,同时细胞内自由基清除剂SOD减少,不能清除过多的OFR,OFR化学活性很高,与细胞膜上的不饱和脂肪酸反应,发生脂质过氧化,可导致细胞损伤坏死。本实验结果表明血疗加舒冠合剂能明显升高缺血细胞SOD水平,降低脂质过氧化产物MDA含量,具有提高自由基清除系统的功能,抑制脂过氧化反应,保护缺血心肌细胞的作用。

    从本实验研究中可以看出,氦氖激光血管内照射与中药舒冠合剂联合应用,在抗心肌缺血,抗脂质过氧化方面的增效作用是显而易见的。因此能够说在众多治疗冠心病方案中,这是非常有前途的一种,尤其是在防治冠心病心肌梗塞发病率方面值得大力推广应用。

    参考文献
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    1 徐淑云,等。药理学实验方法学。第二版,北京:人民卫生出版社 1991:921

    2 大石诚子。过酸化脂质测定法。最新医学(日) 1977;33(4):660

    3 Miera HP,et al.Superoxide diemutase:Aphotchemical autmentationassay.Arch Eiochemistrg and Biophsics 1997;181:308

    4 Lawry DII,et al.Protem measurment with folin phenol agent.J biol ohem 1951;193(1):265

    5 Anand LS,Wahi PL,Dhalla NS.Pathophysiology and pharmacology of heart disease.Boston:Kluwet Academic Publisher 1989:91

    (1998-11-02 收稿), 百拇医药