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编号:10929810
PCR-SSO技术在造血干细胞移植配型中的应用
http://www.100md.com 《中华现代临床医学杂志》 2006年第2期
     人类白细胞抗原(HLA)是由HLA基因复合体编码的产物,是一个十分复杂的系统。HLA分型采用血清学方法、DNA分型方法。笔者采用序列特异性寡核苷酸-聚合酶链反应(PCR-SSO)技术对HLA-A、B、DR类基因进行分型,现报告如下。

     1 材料与方法

    1.1 样本

    选择青岛地区拟进行造血干细胞移植的15名血液病患者及其他20名供者的血液标本。

    1.2 方法

    采用Gentra试剂盒提取DNA,用基因定量仪测定浓度和纯度。采用美国ONELAMBDA公司LAB Type SSOA、B、DR分型试剂盒,严格按照说明书操作。扩增产物利用Luminex判断结果。

     2 结果

    对35名造血干细胞移植供受者HLA-A、B、DR类基因进行了成功的分型。

     3 讨论

    HLA复合体位于人类6p21.31,HLA复合体结构十分复杂,其遗传主要特点是共显性复等位基因遗传。在造血干细胞移植中,供、受者HLA基因配合程度是影响移植效果的重要因素[1,2]。

    HLA配型技术包括血清学、细胞学和DNA分型技术。随着对HLA-Ⅰ类分子研究的不断深入,新确定的特异性位点逐年增加,血清学和细胞学方法不适合于常规检测。PCR-SSO方法操作简单快速,重复性好,准确性高,能鉴定所有已知的等位基因,精确的分析DNA多态性,尤其可以大样本批量进行试验。笔者在35例样本中都能成功分型。

    综上所述,HLA-A、B、DR基因分型PCR-SSO技术准确、特异,可作为造血干细胞移植配型,尤其适合大规模正常人群无关供者筛选的常规方法。

     【参考文献】

    1 肖露露,郝桂琴,叶欣,等.PCR-RSSO基础上HLA-Ⅰ、Ⅱ基因分型的研究.第一军医大学学报,2003,23(1):58-61.

    2 赖淑萍,李生斌,赖江华,等.HLA DRB基因SSO分型方法的研究.中国法医学杂志,1999,14(2):68-72.

    作者单位: 266071 山东青岛,青岛市中心血站中心实验室

    (编辑:陆淼), 百拇医药(胡彬,王海英,刘晓华)