抗人CD16单克隆抗体可变区基因的克隆和表达

http://www.100md.com 解志刚；郭 宁；施 明；冯健男；孙瑛勋；于 鸣；沈倍奋

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     解志刚；郭 宁；施 明；冯健男；孙瑛勋；于 鸣；沈倍奋 军事医学科学院基础医学研究所 北京100850 免疫学杂志 2002 3

    关键词：克隆；CD16；抗体

    目的 克隆抗人CD16单克隆抗体重、轻链可变区(VH,VL)基因并合成单链抗体(ScFv)基因。方法 从分泌抗人CD16单克隆抗体的杂交瘤细胞B88-9中提取总RNA,应用RT-PCR技术获得抗CD16单克隆抗体的VH、VL基因。用连接肽(Linker)将VH和VL连接成具有VH-Linker-VL结构的ScFv基因,将其克隆到表达载体pcDNA3.1(+),并转染COS-7细胞。结果VH基因长度为354bp,属于鼠抗体可变区重链基因家族I(B)亚群;VL基因长度为333bp,属于鼠抗体可变区 kappa轻链基因家族Ⅲ亚群。采用夹心ELISA方法检测到ScFv的表达。结论 抗人CD16单克隆抗体VH与VL基因的克隆和ScFv基因的构建.

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