人IL-18结合蛋白AcDNA的克隆及在COS-7细胞中的表达
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黄 丰；吴达龙；万永玲；吴德政；袁志宏；李克勤
人IL-18结合蛋白A|瞬时表达|COS-7细胞,关键词：
参见附件。
黄 丰；吴达龙；万永玲；吴德政；袁志宏；李克勤 军事医学科学院附属307医院临床药理室；军事医学科学院国家生物医学分析中心免疫研究室；军事医学科学院肿瘤分子生物学实验室 北京100039 免疫学杂志 2002 3
关键词：人IL-18结合蛋白A；瞬时表达；COS-7细胞
目的 克隆人IL-18结合蛋白A(hIL-18 BPa)的 cDNA,观察其在COS-7中的表达。方法 采用RT-PCR自人白血病细胞株jurkat中获得hIL-18BPa的cDNA,将其克隆至T-vector中,经测序确证后,将该基因定向插入真核表达载体pcDNA3.1(+)中。脂质体介导法将其转染COS-7细胞,72h后收集上清纯化,用BCA法测定hIL-18 BPa的含量,用ELISA法测定其活性。结果获得的IL-18BPa的cDNA序列与gene bank登录的cDNA序列一致。上清液中hIL-18 BPa含量为1.4mg/L,并具有良好的生物学活性。结论 成功克隆hIL-18 BPa基因,并实现了在COS-7细胞中的瞬时表达,为研究其活性奠定了基础。
关键词：人IL-18结合蛋白A；瞬时表达；COS-7细胞
目的 克隆人IL-18结合蛋白A(hIL-18 BPa)的 cDNA,观察其在COS-7中的表达。方法 采用RT-PCR自人白血病细胞株jurkat中获得hIL-18BPa的cDNA,将其克隆至T-vector中,经测序确证后,将该基因定向插入真核表达载体pcDNA3.1(+)中。脂质体介导法将其转染COS-7细胞,72h后收集上清纯化,用BCA法测定hIL-18 BPa的含量,用ELISA法测定其活性。结果获得的IL-18BPa的cDNA序列与gene bank登录的cDNA序列一致。上清液中hIL-18 BPa含量为1.4mg/L,并具有良好的生物学活性。结论 成功克隆hIL-18 BPa基因,并实现了在COS-7细胞中的瞬时表达,为研究其活性奠定了基础。
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