【摘要】 目的 利用双向电泳及双向免疫印迹技术研究户尘螨过敏原。方法 纯种户尘螨螨体原料购自Allergon，Inc.，ngelholm，Sweden。用Trizol法提取纯种户尘螨螨体蛋白，用二喹啉甲酸(BCA)检测法测定蛋白质含量，双向电泳及双向免疫印迹技术确定户尘螨过敏原。结果 等电点和分子量分别为5.4，25.6KD的过敏原组分(以下表示方法相同)对应于Der p1;7.6～9.0，15.2KD对应于Der p2;8.1～8.5，28.5～28.6KD对应于Der p3;6.5～7.0，61.0～62.0KD对应于Der p4;7.0～7.3，14.8KD对应于Der p5;5.9～6.1，25.5～25.8KD对应于Der p6;6.9～7.1，26.5KD对应于Der p7;6.8～7.0，24.9KD对应于Der p8;8.8，28.1KD对应于Der p9;6.5～6.8，36.4KD对应于Der p10。与Le Mao一文比较 [3] ，本实验发现了与c、d、e、f点相似特征的C、D、E、F点，它们分别为:C点:8.4～8.9和20KD;D点:7.4～8.5，37.6～38.6KD，Le Mao的d点等电点只有7.6，本实验D点等电点比Le Mao实验的范围要大;E点:7.0～7.6，40.5～41.5KD;F点:5.3，43.8KD。本实验首次在双向电泳及其双向印迹中，证实6.5～6.9，175～180KD的过敏原组分对应于Der p14。本实验新发现5个组分:G点:6.9～7.3和90～93KD为Der p11。H点:7.1～7.5和69.7～70.7KD为Der p18。I点:9.0和14.8KD，可能为Der p5的亚型;J点:等电点为9.0，分子量小于14KD，此过敏原组分可能为大过敏原分子降解后的片段。K点:6.98～7.38，57.0～56.0KD为Der p16。结论 户尘螨过敏原双向电泳指纹图谱可同时直观显示户尘螨过敏原的等电点和分子量。Der p14的成功分离和其它新分离的过敏组分显示用Trizol液提取户尘螨可获得更多的过敏原组分。

    关键词 户尘螨 过敏原 双向电泳 免疫印迹

    Study on finger printing of Dermatophagoides pteronyssinus by two-dimensional immunoblotting

    Sun Jinlu，Zhang Hongyu，Wang Jinglan，et al.

    Department of Allergy ......