CyclinD1、P16、P53基因蛋白在肺癌中表达的研究
【摘要】 目的 研究CyclinD1、P16、P53基因蛋白在肺癌组织中的表达与肺癌临床病理特征的关系。方法 免疫组化S-P法检测78例手术切除肺癌组织标本中CyclinD1、P16、P53基因蛋白的表达。结果 CyclinD1阳性表达与肺癌的组织学类型、分化程度、分期均无相关性(P>0.05)。P53在肺癌的组织学类型中的阳性表达差异均无显著性(P>0.05)，但随肺癌分化程度的降低阳性率明显升高。同时，Ⅰ+Ⅱ期与Ⅲ期肺癌组织中差异有显著性。P16蛋白表达与肺癌的组织学类型、分期无明显相关，而与肿瘤的分化程度有显著相关性，其蛋白表达在分化程度上与P53蛋白表达呈负相关。结论 CyˉclinD1、P16蛋白表达与肺癌的早期发生及发展有关。P53蛋白表达可作为判断肺癌预后的参考指标，P53、P16异常表达的联合检测可为肺癌分化程度的判断提供参考。
关键词 肺癌 免疫组化 CyclinD1 P16 P53
【文献标识码】 A 【文章编号】 1726-7587(2004)06-0785-02
, http://www.100md.com
Study on cyclinD1、P16、P53expressions in lung cancer
Xu Shuxian，Shi Fengyi
Department of Pathology，Jinzhou Medical College，Liaoning121001.
【Abstract】 Objective To study the relationship bwtween the cyclinD1、P16、P53gene protein expressions and clinical pathological characteristics of lung cancer.Methods CyclinD1、P16and P53were detected in78lung cancer issues by using immunological S-P measures.Results CyclinD1expression had no relation to the tumor pathological type、differentiation and stage(P>0.05).P53expression had no significant difference among the tumor pathological types(P>0.05).But the P53expression rose distinctly following the poor tumor differention.There was significant difference between tumor stageⅠ+ⅡandⅢ.The expression of P16had no relation to the tumor pathoˉlogical type and tumor stage，while there was significant difference among the tumor differentiations.P16expressions negatively correlated with P53protein expression in tumor differentiation.Conclusion The expressions ofcyclinD1and P16gene protein are related to the ontogenesis and progression of lung cancer.P53expression contributes to judge the lung cancer prognosis.The abnormal expression of P16、P53could be used to evaluate the tumor differentiation.
, 百拇医药
Key words lung cancer immunohistochemistry cyclinD1 P16 P53 CyclinD1、P16、P53
基因蛋白表达异常与肿瘤的发生、分化程度及预后密切相关。我科采用免疫组化方法检测78例肺癌中CyclinD1、P16、P53基因蛋白表达，研究CyclinD1、P16、P53基因蛋白在肺癌组织中的表达与肺癌临床病理特征的关系。
1 材料与方法
1.1 材料 收集1996～2002年经病理证实的肺癌手术切除标本78例，男53例，女25例，男女之比为2.1∶1，年龄从23～76岁，平均年龄52.3岁。其中鳞癌36例，腺癌27例，小细胞癌15例，各病例均为未接受任何治疗的原发性肺癌。
1.2 方法 所有病例采用免疫组化SP法，试剂为北京中山生物技术有限公司提供的工作液。用PBS代替一抗作为阴性对照，以已知的阳性作为阳性对照。
, 百拇医药
1.3 统计学方法 用χ 2 检验和t检验进行统计学处理，以P<0.05为有统计学意义。
2 结果
2.1 肺癌中CyclinD1、P16及P53蛋白表达与临床病理特征的关系 CyclinD1阳性表达在肺癌的组织学类型之间的差异无显著性(P>0.05)，与非小细胞型肺癌的分化程度和肺癌分期均无相关性(P>0.05)。P16蛋白表达与肺癌的组织学类型、分期无明显相关，而与肿瘤的分化程度有显著相关性，即高分化肺癌组P16蛋白表达率明显高于低分化肺癌组。P53阳性表达鳞癌与腺癌组织、非小细胞癌与小细胞癌组间的差异均无显著性(P>0.05)。在分化程度和TMN分期方面，P53阳性表达随肺癌分化程度的降低而明显升高，且在Ⅰ+Ⅱ期与Ⅲ期肺癌组织中差异存在显著性。见表1。
2.2 肺癌中P16蛋白表达与P53蛋白表达的相关性 从肺癌分化程度的角度来看，P16蛋白表达水平随P53蛋白表达水平的升高而明显降低，表明P16蛋白表达与P53蛋白表达呈负相关。
, 百拇医药
3 讨论
文献表明，肺癌的发生与癌基因激活，抑癌基因失活密切相关 [1] 。CyclinD1基因是近几年来提出的重要原癌基因 [2] ，基因蛋白产物在细胞周期关键限速点G 1 -S转换中起重要正调控作用，该蛋白通过与细胞周期素依赖激酶4结合形成复合物加快细胞由G 1 期进入S期，正调节细胞增殖周期，关键限速点处正性调节基因CyclinD1的失控表达，引起细胞周期失控，从而引起癌变 [3] 。P16、P53都是抑癌基因，P16直接参与细胞周期的调控，它能竞争性结合细胞
表1 CyclinD1、P16、P53阳性表达与肺癌组织学分型、非小细胞癌分化程度、TMN分期的关系
周期素依赖激酶4，并使后者失活，阻止细胞由G 1 期进入S期，从而负调节细胞增殖周期 [4] 。P53基因主要是调控细胞的增殖与分化，在肿瘤中表现为突变型异常表达，其在肺癌中突变率为43%～75% [5，6] 。由此可见，CyclinD1基因的过表达，P16的缺失表达，P53的突变表达在肺癌的发生和发展中起着重要作用。
, 百拇医药
本实验结果显示，CyclinD1在各细胞类型肺癌中均过表达，其过表达与癌细胞的分化程度及肺癌TNM分期不相关，提示CyclinD1的过表达可能在肺癌的发生早期起一定 作用。P53在肺癌分化差、临床分期晚的组织阳性率高，在不同组织学类型中，P53表达差异无显著性，提示P53是判断肺癌预后的一个重要参考指标。P16缺失表达同CyˉclinD1过表达与肺癌的组织学类型，TMN分期无明显相关，但在低分化肺癌中存在明显差别，提示P16同CyclinD1一样，也可能参与肺癌的早期发生，二者有助于肺癌的早期诊断。P16蛋白阳性表达水平随P53阳性表达水平的升高而降低，两者呈负相关，提示P53、P16异常表达可作为判断肺癌分化程度的参考指标，即P53阳性、P16阴性，肿瘤分化差;反之分化好。
通过检测CyclinD1、P53、P16蛋白表达，研究细胞周期、细胞增殖分化调控与肿瘤发生、分化的关系。为临床对肺癌的诊断、分期、治疗及判断预后提供参考，同时对探索肺癌的形成机制，肺癌治疗方面也有一定帮助。
, 百拇医药
参考文献
1 Minner D.Tumor suppressor genes and oncogenes in lung cancer potenˉtial clinical applications.Advances in Oncology，1996，12(1):3-5.
2 Motokura T，BloomT.A novel cyclin encoded by a bel-1-linked canˉdidate oncogene.Nature，1991，350:512-515.
3 Nagai MA.Genetic alterations in head and neck squamous cell carcinoˉmas.Braz J Med Biol Res，1999，32:897-904.
, 百拇医药
4 He XS，Su Q，Chen ZC，et al.Expression，deletion and mutation of P16gene in human gastric cancer.World J Gastroenterol，2001，7:515-521.
5 Quinnlan DC，Davalson AG.Summers CI.Accumulation of P53protein correlates with a poor prognosis in human lung cancer.Cancer Res，1992，52:4828.
6 Milusdomi T，Stinberg SM，Nau NH P53gene mutation in non-small cell lung cancer line and their correlation with the presence of ras mutaˉtion and clinical feature.Oncogene，1992，7:171.
作者单位:121001辽宁锦州医学院病理教研室
121000辽宁锦州解放军第205医院病理科
(收稿日期:2004-03-20)
(编辑李 阳), http://www.100md.com
关键词 肺癌 免疫组化 CyclinD1 P16 P53
【文献标识码】 A 【文章编号】 1726-7587(2004)06-0785-02
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Study on cyclinD1、P16、P53expressions in lung cancer
Xu Shuxian，Shi Fengyi
Department of Pathology，Jinzhou Medical College，Liaoning121001.
【Abstract】 Objective To study the relationship bwtween the cyclinD1、P16、P53gene protein expressions and clinical pathological characteristics of lung cancer.Methods CyclinD1、P16and P53were detected in78lung cancer issues by using immunological S-P measures.Results CyclinD1expression had no relation to the tumor pathological type、differentiation and stage(P>0.05).P53expression had no significant difference among the tumor pathological types(P>0.05).But the P53expression rose distinctly following the poor tumor differention.There was significant difference between tumor stageⅠ+ⅡandⅢ.The expression of P16had no relation to the tumor pathoˉlogical type and tumor stage，while there was significant difference among the tumor differentiations.P16expressions negatively correlated with P53protein expression in tumor differentiation.Conclusion The expressions ofcyclinD1and P16gene protein are related to the ontogenesis and progression of lung cancer.P53expression contributes to judge the lung cancer prognosis.The abnormal expression of P16、P53could be used to evaluate the tumor differentiation.
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Key words lung cancer immunohistochemistry cyclinD1 P16 P53 CyclinD1、P16、P53
基因蛋白表达异常与肿瘤的发生、分化程度及预后密切相关。我科采用免疫组化方法检测78例肺癌中CyclinD1、P16、P53基因蛋白表达，研究CyclinD1、P16、P53基因蛋白在肺癌组织中的表达与肺癌临床病理特征的关系。
1 材料与方法
1.1 材料 收集1996～2002年经病理证实的肺癌手术切除标本78例，男53例，女25例，男女之比为2.1∶1，年龄从23～76岁，平均年龄52.3岁。其中鳞癌36例，腺癌27例，小细胞癌15例，各病例均为未接受任何治疗的原发性肺癌。
1.2 方法 所有病例采用免疫组化SP法，试剂为北京中山生物技术有限公司提供的工作液。用PBS代替一抗作为阴性对照，以已知的阳性作为阳性对照。
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1.3 统计学方法 用χ 2 检验和t检验进行统计学处理，以P<0.05为有统计学意义。
2 结果
2.1 肺癌中CyclinD1、P16及P53蛋白表达与临床病理特征的关系 CyclinD1阳性表达在肺癌的组织学类型之间的差异无显著性(P>0.05)，与非小细胞型肺癌的分化程度和肺癌分期均无相关性(P>0.05)。P16蛋白表达与肺癌的组织学类型、分期无明显相关，而与肿瘤的分化程度有显著相关性，即高分化肺癌组P16蛋白表达率明显高于低分化肺癌组。P53阳性表达鳞癌与腺癌组织、非小细胞癌与小细胞癌组间的差异均无显著性(P>0.05)。在分化程度和TMN分期方面，P53阳性表达随肺癌分化程度的降低而明显升高，且在Ⅰ+Ⅱ期与Ⅲ期肺癌组织中差异存在显著性。见表1。
2.2 肺癌中P16蛋白表达与P53蛋白表达的相关性 从肺癌分化程度的角度来看，P16蛋白表达水平随P53蛋白表达水平的升高而明显降低，表明P16蛋白表达与P53蛋白表达呈负相关。
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3 讨论
文献表明，肺癌的发生与癌基因激活，抑癌基因失活密切相关 [1] 。CyclinD1基因是近几年来提出的重要原癌基因 [2] ，基因蛋白产物在细胞周期关键限速点G 1 -S转换中起重要正调控作用，该蛋白通过与细胞周期素依赖激酶4结合形成复合物加快细胞由G 1 期进入S期，正调节细胞增殖周期，关键限速点处正性调节基因CyclinD1的失控表达，引起细胞周期失控，从而引起癌变 [3] 。P16、P53都是抑癌基因，P16直接参与细胞周期的调控，它能竞争性结合细胞
表1 CyclinD1、P16、P53阳性表达与肺癌组织学分型、非小细胞癌分化程度、TMN分期的关系
周期素依赖激酶4，并使后者失活，阻止细胞由G 1 期进入S期，从而负调节细胞增殖周期 [4] 。P53基因主要是调控细胞的增殖与分化，在肿瘤中表现为突变型异常表达，其在肺癌中突变率为43%～75% [5，6] 。由此可见，CyclinD1基因的过表达，P16的缺失表达，P53的突变表达在肺癌的发生和发展中起着重要作用。
, 百拇医药
本实验结果显示，CyclinD1在各细胞类型肺癌中均过表达，其过表达与癌细胞的分化程度及肺癌TNM分期不相关，提示CyclinD1的过表达可能在肺癌的发生早期起一定 作用。P53在肺癌分化差、临床分期晚的组织阳性率高，在不同组织学类型中，P53表达差异无显著性，提示P53是判断肺癌预后的一个重要参考指标。P16缺失表达同CyˉclinD1过表达与肺癌的组织学类型，TMN分期无明显相关，但在低分化肺癌中存在明显差别，提示P16同CyclinD1一样，也可能参与肺癌的早期发生，二者有助于肺癌的早期诊断。P16蛋白阳性表达水平随P53阳性表达水平的升高而降低，两者呈负相关，提示P53、P16异常表达可作为判断肺癌分化程度的参考指标，即P53阳性、P16阴性，肿瘤分化差;反之分化好。
通过检测CyclinD1、P53、P16蛋白表达，研究细胞周期、细胞增殖分化调控与肿瘤发生、分化的关系。为临床对肺癌的诊断、分期、治疗及判断预后提供参考，同时对探索肺癌的形成机制，肺癌治疗方面也有一定帮助。
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参考文献
1 Minner D.Tumor suppressor genes and oncogenes in lung cancer potenˉtial clinical applications.Advances in Oncology，1996，12(1):3-5.
2 Motokura T，BloomT.A novel cyclin encoded by a bel-1-linked canˉdidate oncogene.Nature，1991，350:512-515.
3 Nagai MA.Genetic alterations in head and neck squamous cell carcinoˉmas.Braz J Med Biol Res，1999，32:897-904.
, 百拇医药
4 He XS，Su Q，Chen ZC，et al.Expression，deletion and mutation of P16gene in human gastric cancer.World J Gastroenterol，2001，7:515-521.
5 Quinnlan DC，Davalson AG.Summers CI.Accumulation of P53protein correlates with a poor prognosis in human lung cancer.Cancer Res，1992，52:4828.
6 Milusdomi T，Stinberg SM，Nau NH P53gene mutation in non-small cell lung cancer line and their correlation with the presence of ras mutaˉtion and clinical feature.Oncogene，1992，7:171.
作者单位:121001辽宁锦州医学院病理教研室
121000辽宁锦州解放军第205医院病理科
(收稿日期:2004-03-20)
(编辑李 阳), http://www.100md.com